Посев мочи на бактерии как сдавать. Правила сбора мочи на бакпосев

Бакпосев мочи - высокоинформативное исследование для выявления вида микроорганизмов, установления причины инфекционной патологии. Анализ показывает концентрацию бактерий в собранном материале. Чем больше опасных микробов, тем активнее прогрессирует воспалительный процесс.

Бактериологическое изучение урины - сложное исследование. Пациент должен правильно подготовиться к анализу, собрать жидкость с учетом рекомендаций уролога. Преимущества метода, показания, расшифровка результатов, норма, причины повышенного содержания микроорганизмов - эти и другие важные моменты описаны в статье.

Общая информация

Важно разобраться, какие виды условно-патогенной флоры, простейших, грамотрицательных и грамположительных бактерий проникли в мочевыводящие пути. Одно из преимуществ бактериального анализа урины - возможность контролировать ход лечения: сравнивать количественные показатели до начала терапии, в процессе и по окончании курса. После выздоровления показатели должны вернуться к норме.

Бакпосев показывает:

• концентрацию возбудителей в органах мочеполовой системы;
• вид патогенной флоры;
• действие различных антибиотиков на выявленные микроорганизмы.

Благодаря специальной технике исследования, лаборант определяет, какой препарат поможет подавить активность определенного возбудителя. Напротив каждого антибиотика указана характеристика: чувствителен, слабо чувствителен, нечувствителен. Уролог выбирает из предложенных вариантов препарат, к которому наиболее чувствительны выявленные инфекционные агенты. В графах есть не только буквы, но и количественное значение по каждому наименованию антибактериальных средств.

Показания к проведению анализа

Уролог назначает анализ при подозрении на развитие таких патологий, как:

• острый и рецидивирующий ;
• хроническая форма .

Контроль бактериальной флоры проводят при выявлении у пациента:

• ВИЧ-инфекции;
• Сахарного диабета.

Как действовать:

• за пару дней отказаться от приема лекарств. Если невозможно выполнить это условие (сердечные, гипотензивные препараты), то лаборант и врач должны знать об этом;
• не стоит есть морковь либо свеклу: корнеплоды окрашивают урину;
• перед анализом нельзя принимать физиопроцедуры, делать интенсивную зарядку;
• при прохождении антибактериальной терапии материал собирают между курсами либо в период, указанный лечащим врачом.

Как правильно сдать урину

Детям старшего возраста и взрослым для сбора урины подходит стерильный контейнер: емкость продается в аптеке. Грудничкам медики рекомендуют купить специальный мочеприемник из плотного полиэтилена. Изделие позволяет собрать урину без особых проблем даже у беспокойных малышей. Важный момент - отсутствие контакта мочи с окружающей средой, риск проникновения бактерий из воздуха практически нулевой.

Техника сбора биоматериала:

• вымыть руки;
• тщательно обмыть половые органы. Допустимо использование мыла, но бактерицидные составы применять нельзя;
• в период менструации и 2 дня после окончания кровотечения сдавать анализ запрещено: в урину проникают частицы крови, результат неточен;
• после обработки гениталии нужно промокнуть чистой салфеткой для удаления остатков воды;
• открыть емкость, первую струю урины направить в унитаз, далее наполнить контейнер или прокипяченную сухую баночку (мочи - не менее 20 мл), сразу завинтить крышку, чтобы бактерии из окружающей среды не попали в биоматериал;
• отнести собранную жидкость в лабораторию. При комнатной температуре можно хранить материал не более двух часов, если в помещении жарко, то на 3-4 часа можно убрать емкость в холодильник (температура - от +4 до + 8 градусов). Урину замораживать нельзя, нахождение емкости при температуре выше 25 градусов ускоряет размножение микроорганизмов - результат будет неверным.

На заметку! Некоторые пациенты нарушают рекомендации врача, наполняют баночку уриной вечером, оставляют в комнате, утром относят анализ в лабораторию. При таком подходе к сдаче биоматериала сложно ожидать точных данных. Есть еще опасный момент - активное размножение бактерий на протяжении ночи вводит врача в заблуждение, специалист предполагает более тяжелую форму патологии, чем есть на самом деле. Неоправданное применение сильнодействующих антибиотиков, нитрофуранов, других препаратов может нанести вред здоровью.

Взрослые

Инфекции мочеполовой сферы - распространенное явление. часто диагностируют у женщин, развивается у представителей обоих полов. Одна из причин - проникновение кишечной палочки из области ануса в уретру (проблема чаще появляется у женщин). Нередко возбудители поднимаются выше, попадают в почки.

При букете хронических болезней инфекция часто проникает с лимфо-и кровотоком из других отделов в мочевыводящие пути и естественные фильтры. При несоблюдении гигиены половой жизни анализ показывает наличие возбудителей венерических заболеваний.

Дети

Распространенный симптом у детей разного возраста. Одна из причин - плохая гигиена половых органов, нахождение ребенка в грязных, промокших пеленках, редкая смена подгузников. Нередко дети сидят на холодных поверхностях во время игр на улице, застуживают мочевой пузырь и половые органы.

Промокшие ноги, сквозняки, инфекции в носоглотке, кишечнике - причины воспалительного процесса в почках, мочевыводящих путях. Важно знать: некоторые антибактериальные составы запрещены в детском возрасте, бесконтрольный прием таблеток может вызвать резистентность микроорганизмов либо спровоцировать развитие побочных эффектов.

Бакпосев мочи при беременности

Бакпосев - обязательный вид диагностики для контроля состояния флоры, своевременного выявления опасных возбудителей. Женщина сдает урину для бактериологического изучения при постановке на учет в женскую консультацию и в срок 36 недель. При подозрении на развитие инфекции гинеколог назначает внеплановое исследование.

В период вынашивания ребенка любая инфекция отрицательно отражается на состоянии плода. По этой причине важно вовремя выявить и пролечить заболевание. Беременным не подходят многие антибиотики. Врачи выбирают наиболее безопасный препарат из наименований, к которым чувствителен возбудитель.

Расшифровка результатов

Для обозначения одной микробной группы используют специальную единицу - КОЭ. Если показатели находятся на уровне 1000, то врачи подозревают неправильный сбор урины, проникновение микроорганизмов из влагалища либо с немытых рук. При выявлении незначительного отклонения величины КОЭ назначают повторный сбор урины.

На заметку! Результат анализа готов через 4-5 дней. Применение экспресс-тестов сокращает срок исследования до двух дней. Современные методики не только выявляют оптимальные виды антибактериальных составов, но и показывают терапевтическую дозу. При поступлении в стационар тяжелых больных медики берут мочу на анализ, промежуточный результат исследования готов уже спустя 4 часа.

Норма

В моче не должно быть грибков, простейших, бактерий. Появление одного либо нескольких видов микроорганизмов требует пересдачи анализа. Если повторное исследование подтверждает наличие инфекционного агента, то медики назначают лечение в зависимости от результатов теста на чувствительность к антибактериальным составам.

Бактериурия - признак воспаления в мочеполовой системе. При острых формах цистита, уретрита проявляются клинические признаки воспалительного процесса: повышение температуры, нарушение частоты выведения мочи, сильные , боль в поясничной зоне, моча изменяет цвет и запах.

Узнайте о причинах при беременности и о вариантах коррекции показателей.

Инструкция по применению комплекса Макмирор для лечения урогенитальных инфекций описана странице.

Перейдите по адресу и прочтите о том, как делают рентген почек и как подготовиться к исследованию.

Причины отклонений

Для разных нозологических форм характерна определенная величина КОЭ:

• - от 10000 КОЭ и более;
• цистит - показатели 100 КОЭ свидетельствуют о развитии воспалительного процесса;
• катетерная инфекция при высокой активности возбудителя - значения превышают 1000000 КОЭ. Требуется срочная терапия.

Что делать:

• при выявлении бактериурии нужно провести дополнительные исследования, сделать и , ;
• антибактериальную терапию важно сочетать с диетой, обильным питьем для удаления инфекционных агентов из мочевыводящих путей, постельным режимом (при тяжелых формах патологий);
• полезны , травяные отвары, ;
• нельзя допустить перехода бактериальной инфекции в хроническую форму: частые рецидивы отрицательно влияют не только на мочевыводящие пути, но и на общее состояние;
• важно соблюдать меры профилактики: укреплять иммунитет, не переохлаждаться, отказаться от алкоголя, бросить курить. Полезно больше ходить, заниматься физкультурой. Обязательна тщательная гигиена области гениталий, особенно, в период менструаций.

Бакпосев мочи показывает вид возбудителя, количество микроорганизмов в образце, степень тяжести инфекционной патологии. Исследование проводят при подозрении на бактериальную инфекцию для пациентов любого возраста. По результатам анализа врач назначает антибиотик, наиболее активный в отношении выявленных патогенных микроорганизмов.

Бакпосев мочи представляет собой один из самых распространенных видов исследований, которые выявляют инфекции мочевыделительной системы как мужчин, так и женщин. Подробнее о том, как правильно собрать урину и что делать при выявлении бактериурии узнайте из следующего ролика:

Бактериологический посев мочи (или бак посев) необходим для выявления и идентификации возбудителей мочевых инфекций, с дальнейшим определением чувствительности вредоносных бактерий к антибиотикам.

Бак посев при беременности сдается дважды – при постановке на учёт и перед родами (где-то в 36 недель беременности). При обнаружении в общем анализе мочи лейкоцитов и/или белка, а также при заболеваниях почек и мочевого пузыря сдачу мочи на бак посев назначают чаще.

При лечении урологических инфекционных заболеваний для контроля назначают сдачу повторного бак посева мочи через неделю после отмены антибиотика или уросептика.

Контейнер для сбора мочи

Зачем нужно сдавать бак посев мочи при беременности?

Бакпосев мочи является одним из важных анализов при беременности, поэтому он входит в список обязательных анализов во время беременности. Даже при хорошем общем анализе мочи, с помощью бак посева можно найти хроническую или скрытую (бессимптомную) форму того или иного инфекционного заболевания моче-почечной системы. Лучше предотвратить развитие болезни, чем лечить запущенную стадию заболевания, рискуя родить нездорового ребенка или даже потерять его.

Бессимптомная бактериурия встречается приблизительно у 6% беременных с нормальным общим анализом мочи. В таких анализах чаще всего обнаруживается значительный рост Escherichia coli (кишечная палочка), Enterococcus faecalis (энтерококк фекальный), Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк), грибы типа Candida и прочие.

При отсутствии или несвоевременном лечении, инфекция распространяется дальше, поражая почки. Тогда начинается пиелонефрит – воспаление почек бактериальной этиологии.

Пиелонефрит может произойти при двух условиях: 1) от очага инфицирования бактерии распространяются далее, достигая почек; 2) количество патогенных бактерий, которые присутствуют в каждом организме в незначительном числе, начинает увеличиваться при благоприятных для размножения условиях, например, при снижении иммунитета «плюс» застое мочи.

Пиелонефрит во время беременности чаще всего возникает по причинам:

• снижения тонуса мочеточников и увеличения их длины и ширины под действием гормонов беременности, что может привести к застою мочи, где начинают развиваться патогенные микроорганизмы;
• увеличения матки, что может привести к сдавливанию мочевыводящих путей (особенно часто такая картина наблюдается у беременных женщин с узким тазом), что также вызывает застой мочи;
• гормональных изменений при беременности, которые могут привести к расширению яичниковых вен, сдавливающих мочеточник, тем самым, нарушая отток мочи и пр.

Пиелонефрит может стать причиной внутриутробного инфицирования плода, самопроизвольного прерывания беременности, а в третьем триместре причиной преждевременных родов. Поэтому необходимо вовремя провести лечение, дабы сохранить здоровье малыша. При беременности для лечения пиелонефрита обычно назначают щадящий антибиотик, например, Амоксиклав или Монурал , в сочетании со спазмолитиком, успокоительным сбором, витаминами группы В, РР и С.

Как правильно собирать мочу для анализа на бак посев?

Часто результаты анализов искажены из-за неправильного забора мочи. Подготовьте стерильную сухую ёмкость с плотно закручивающейся крышкой для сбора анализов (желательно прозрачную). Специальные баночки для сбора анализов мочи можно приобрести в аптеках практически по копеечной цене.

Непосредственно перед самим сбором мочи необходимо тщательно провести туалет наружных половых органов с использованием туалетного мыла. Рекомендуется беременным женщинам куском стерильной ваты при сборе мочи прикрывать вход во влагалище, дабы в сбор мочи ничего не занести из половых путей. Не забудьте вымыть и руки, чтобы случайно не перенести с рук бактерии.

Для исследования необходимо собрать среднюю порцию утренней мочи (выделяемую сразу же после пробуждения) в количестве не менее 70 мл. Для этого необходимо первую и последнюю струю мочи при мочеиспускании пропустить. Т.е. начните мочиться, потом задержите поток и подставьте баночку, продолжите мочеиспускание в баночку, к концу процесса снова задержите поток, отставьте баночку в сторону, закрутив её крышкой, и закончите мочиться.

В лабораторию анализ мочи необходимо сдать в течение 1,5-2 часов после её сбора.

Помните, что за сутки-двое до сдачи анализа мочи не рекомендуется употреблять продукты, способные окрасить мочу, например, свеклу и морковь , а также мочегонные и другие лекарственные препараты, способные повлиять на результат анализа.

Обратите внимание, чрезмерная физическая нагрузка способна увеличить концентрацию белка в моче, поэтому за сутки до сдачи анализа снизьте физическую нагрузку до минимума.

Расшифровка бак посева мочи при беременности

В организме здорового человека присутствуют всевозможные патогенные микробы и палочки, но в незначительном количестве. Лечение необходимо только в случае увеличения их роста, так как размножение вредоносных микроорганизмов влечёт за собой появление разного рода заболеваний.

Отказ от лечения грозит тяжёлыми последствиями не только для собственного здоровья, но и для здоровья малыша, которого женщина носит под сердцем. Поэтому в период беременности обязательно должен назначаться бак посев мочи.

В результатах бак посева мочи отмечается наличие («+») или отсутствие («–») роста вредоносных микроорганизмов. Если рост бактерий всё-таки выявлен, то тут же лаборант проводит исследование на определение чувствительности бактерий к разным видам антибиотиков – антибиотикограмму.

Величина измерения количества микроорганизмов – КОЕ/мл.

КОЭ (колониеобразующие единицы) – это одна клетка микроба, которая через время превратиться в колонию таких клеток.

И если гинеколог говорит, что у беременной плохой бак посев мочи, то это значит, что обнаружен рост возбудителей инфекции. Лечение производиться антибиотиками, и никак не одним Канефроном или клюквенным морсом. В дополнении к антибиотикотерапии могут назначаться другие препараты.
Обычно при плохом бак посеве мочи дополнительно назначается УЗИ почек и мазок из уретры, чтобы определить заболевание и назначить правильное его лечение.

Для определения многих скрытых бактериальных инфекций, возникающих при беременности, исследуется бакпосев мочи. Это исследование проводится в гинекологии довольно часто. Данная статья поможет разобраться будущим мамам в том, когда же назначается бакпосев мочи и как к нему качественно подготовиться.

В каких случаях проводится?

Определить возбудителей различных инфекций мочевыводящих путей и почек можно только с помощью проведения бактериологического исследования мочи. Этот анализ в настоящее время проводится практически в каждой лаборатории. Сдать мочу на такое исследование можно как в обычной гинекологической поликлинике, так и в частном медицинском центре.

Опасность инфицирования плода микробами довольно большая. Бактерии, имея довольно маленький размер, отлично проникают через плацентарный барьер. Попадая в системный кровоток плода, они могут привести к развитию у него различных патологических состояний. Исследование мочи в этом случае позволяет выявлять таких возбудителей в довольно короткие сроки.

Назначаться данное исследование может будущим мамочкам, которые имеют различные заболевания мочевыводящих органов и почек.

В этом случае совсем необязательно, чтобы данные патологии протекали у них в стадии обострения. В некоторых ситуациях даже латентный пиелонефрит может проявиться характерными изменениями в общем анализе и бакпосеве мочи. В этом случае, как правило, требуется назначение специальных урологических препаратов для коррекции возникших нарушений.

Даже при физиологическом течении беременности, протекающем без различных отклонений, врачи могут назначить двукратное проведение этого исследования. Они необходимы для исключения всех «немых» патологий, которые могут привести к развитию у плода различных патологических состояний. Обычно такое обследование проводится на 9-12 и 35-36 неделях беременности.

Если беременная женщина длительное время страдает сахарным диабетом, особенно протекающим с постоянно высоким содержанием в крови уровня сахара, то в этом случае также может потребоваться проведение бактериологического исследования мочи. Стойкая гипергликемия может вызвать поражение почечной ткани. Такое состояние является крайне неблагоприятным, особенно во время беременности.

Бак посев может быть назначен врачом и в том случае, если во время выполнения скрининга в моче у беременной женщины был обнаружен белок. В этой ситуации требуется обязательно исключить у будущей мамы хронический пиелонефрит, который протекает без выраженных клинических признаков.

Если у беременной женщины до наступления зачатия имелась мочекаменная болезнь, то в таком случае также проведение бакпосева не будет лишним. Это заболевание довольно часто сопровождается воспалением почечной ткани и мочевыводящих путей. Осложнением данного состояния является появление в моче различных патогенных микробов. Это можно легко определить, проведя беременной женщине бактериологическое исследование.

Возникновение внезапно развившейся сильной болезненности в пояснице, повышение температуры тела до фебрильных значений, развитие на теле сильных отеков – все эти симптомы требуют также обязательного проведения расширенного комплекса диагностики. В него включается также и бакпосев. Довольно часто данные неблагоприятные симптомы являются следствием обострения пиелонефрита. В такой ситуации требуется срочная консультация уролога и назначение уросептических препаратов, которые возможно использовать во время беременности.

Укажите первый день последней менструации

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Января Февраля Марта Апреля Мая Июня Июля Августа Сентября Октября Ноября Декабря 2019 2018

Как правильно собрать мочу?

Перед сдачей бактериологического анализа очень важно соблюдать несколько основных правил. Они необходимы для того, что результат выполненного исследования был максимально информативным. Обычно врачи-гинекологи дают небольшие инструкции и рекомендации беременным, которые приходят к ним на прием о том, как правильно следует собирать мочу на исследование.

Ужин перед процедурой сбора мочи следует сделать максимально легким. Не следует злоупотреблять жирной, жареной или чрезмерно соленой пищей. Такая еда может привести к тому, что полученные результаты анализа могут оказаться неточными.

Перед сдачей бакпосева следует исключить любые физические нагрузки. Допускается лишь ходьба в медленном темпе. Занятия йогой для беременных, подъемы по лестнице сразу на несколько лестничных проемов или уборку квартиры лучше отложить на время после процедуры.

Накануне исследования, по возможности, следует ограничить прием диуретических (мочегонных) средств. Перед тем, как это сделать, необходимо обязательно проконсультироваться с лечащим врачом . В некоторых ситуациях делать это нельзя, так как могут возникнуть неприятные последствия. Однако прием диуретических средств может привести к тому, что результат анализа будет несколько неточным.

Питьевой режим до проведения бакпосева сохраняется прежним. Беременным женщинам, собирающимся сдавать анализ, не следует ограничивать прием жидкостей.

Исключение – женщины, страдающие сильными отеками и гестозом. В этом случае употребление жидкости должно быть строго дозированным.

Гигиена наружных половых органов – важный пункт подготовки перед проведением такого анализа. Следует помнить, что при сборе материала на бакпосев соблюдение гигиенических правил играет существенную роль.

Перед проведением забора жидкости следует обязательно хорошо промыть наружные половые органы . Делать это можно обычной проточной теплой водой. Кипятить воду или использовать специальные антисептические средства перед проведением сбора анализа мочи на бакпосев не следует. После мытья половых органов их следует аккуратно промокнуть чистым отутюженным полотенцем.

Собирать мочу на исследование следует в утренние часы. Обычно врачи рекомендуют это сделать сразу же после пробуждения. Емкость, в которую будет собираться моча, должна быть максимально чистой. Если есть возможность использовать стерильный контейнер, то это будет большой удачей. Как правило, такие контейнеры применяются только в стационарах.

В настоящее время в аптеках продаются специальные пластмассовые емкости, в которые можно собирать мочу для проведения исследования. Закручиваются они с помощью специальной крышки. Это позволяет предупредить то, что собранная жидкость во время транспортировки в лабораторию может разлиться или в нее попадут какие-то дополнительные микробы из окружающей среды.

Многие мамочки приносят на исследование мочу, собранную в стеклянную баночку из-под детского питания. Для сбора бакпосева эта емкость не подходит. Объясняется это весьма некачественной обработкой посуды. Микроскопические остатки пищи, оставшиеся на стенках такой баночки, могут привести к тому, что после проведения исследования будут получены недостоверные результаты.

Собирать на исследование следует среднюю порцию . Для этого нужно сначала помочиться в унитаз. Такое мочеиспускание называется первичным. Обычно для прохождения первой порции достаточно 2-3 секунд. Собирается при этом на исследование следующий объем выделяемой жидкости. Обычно ее требуется для анализа около 80 мл.

Следующим очень важным этапом является транспортировка анализа до лаборатории. Сделать это следует через 1,5-2 часа с момента сбора биологического материала. Более длительное время транспортировки будет способствовать тому, что полученные результаты будут неточными.

В госпитальных условиях медицинского учреждения проводятся также и инвазивные методы по сбору мочи. Они включают в себя проведение надлобковой пункции, а также катетеризацию. Эти методы довольно травматичны и должны проводиться только опытными специалистами.

Неправильная техника выполнения данных исследований может способствовать нанесению различных повреждений. Обычно сбор анализа таким образом выполняется только в тех ситуациях, когда собрать мочу на исследование привычным способом нельзя. Как правило, эти случаи возникают при различных предшествующих травмах уретры.

Расшифровка

Наиболее часто врачи пытаются обнаружить различные виды стафилококков, стрептококки, анаэробные микроорганизмы, а также грибковую флору. Обычно эти возбудители довольно хорошо выявляются при помощи проведения бакпосева мочи. Существуют определенные нормы, которые применяются в разные периоды беременности. Расшифровать проведенный анализ поможет лечащий врач.

Как правило, результат бакпосева оценивается с помощью «+» и «-». Эти знаки ставятся около каждого вида исследуемых микроорганизмов. Они обозначают присутствие или отсутствие их в полученном образце. Большая концентрация микробов может выражаться двумя или тремя плюсами. В этом случае врачи говорят о том, что данный тест является положительным по выявлению определенного вида бактерий.

Знак «-» свидетельствует о том, что в полученном образце данные микробы не были обнаружены. Такой анализ называется отрицательным.

Для количественной оценки врачи пользуются специальными единицами измерения, которые называются колониеобразующими или КОЕ. Они рассчитываются на 1 мл исследуемой жидкости. Ученые считают, что 1 КОЕ – это один микроорганизм, который способствовал появлению одной большой колонии.

Оценка результатов проводится с количественным подсчетом. Так, 1000-10000 КОЕ/мл говорит о том, что результат анализа является сомнительным. В этом случае врачи, как правило, порекомендуют беременной женщине пересдать данный лабораторный тест повторно.

Менее 1000 КОЕ свидетельствует о том, что какие-либо патологические нарушения в представленном образце отсутствуют. Такие анализы встречаются при неосложненном течении беременности, а также в тех ситуациях, когда у будущей мамочки отсутствуют какие-либо признаки заболеваний почек и мочевыводящих путей.

Повышение показателя выше 10000 КОЕ/мл, как правило, является неблагоприятным признаком. Такая ситуация развивается при наличии инфекций мочевыводящих путей или различных патологий почек. В этом случае требуется более детальное проведение дополнительных вспомогательных методов диагностики. Также в такой ситуации беременная женщина обязательно направляется на консультацию к урологу.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче , и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

• Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают ;
• Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
• Наличием патогенных микробов , которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов , которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

• Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
• Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
• Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

• У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
• У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
  1. дифтероидами;
  2. стафилококками;
  3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала , перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку , окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14 , поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный (обычно это Candida albicans), и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Видео: ролик-демонстрация по бак-посеву из цервикального канала

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает , приносящая большой вред не только при беременности . Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

• Бактериальной петлей;
• Пастеровской пипеткой;
• Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1: 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

• Размер и форму бактериальной клетки;
• Наличие капсул, жгутиков, спор;
• Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном . Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

В урологической практике инфекции мочевых путей являются наиболее часто встречающимися бактериальными заболеваниями, в лечении и диагностике которых имеются свои трудности, наиболее часто связанные с атипичным характером возбудителя и его устойчивостью к проводимой антибактериальной терапии.

Поэтому, согласно современным медицинским рекомендациям, для диагностики и мониторинга течения инфекций мочевыводящих путей у лиц повышенного риска обязательное проведение бакпосева мочи. В этом материале мы рассмотрим, что такое бакпосев мочи, что показывает этот анализ и как правильно к нему подготовиться.

Бактериологический посев (бакпосев или бактериологическое исследование мочи) на наличие патологической микрофлоры – высокоточный микробиологический анализ, позволяющий не только выделить и идентифицировать возбудителя мочевой инфекции, но и определить его точную концентрацию (степень бактериурии), а также степень чувствительности к важнейшим группам антибактериальных средств.

Исследование позволяет:

1. 1 Идентифицировать возбудителя инфекции;
2. 2 Определить его диагностический титр в 1 мл мочи;
3. 3 Выявить наличие антибиотикорезистентности (устойчивости или чувствительности к антибиотикам);
4. 4 Отслеживать снижение титра возбудителя в процессе терапии;
5. 5 Выбрать наиболее эффективные антибактериальные препараты лечения;
6. 6 Осуществлять мониторинг распространённости в популяции антибиотико-резистентных штаммов микроорганизмов.

• Показать всё

  1. Показания к бактериологическому исследованию мочи

  Основными целями анализа, которые преследует лечащий врач при назначении бакпосева мочи, являются диагностика и мониторинг бактериальных инфекций органов мочевого тракта, а также определение чувствительности патогена к антибиотикотерапии.

  Иногда бактериологическое исследование (бакпосев) мочи применяется в качестве скрининга для профилактики воспалительных заболеваний мочевого тракта у лиц повышенного риска (беременные, пожилые, больные сахарным диабетом). Основным показанием к назначению бакпосева мочи является наличие симптомов мочевой инфекции.

  Однако, согласно российским урологическим рекомендациям, при выявлении у пациента неосложненной мочевой инфекции, а также при отсутствии сопутствующих заболеваний, антибактериальная терапия может назначаться эмпирическим путем, без предварительного определения возбудителя. Эмпирическое назначение антибиотиков позволяет достичь положительного эффекта примерно в 75-80% случаев.

  Безусловными показаниями к проведению исследования мочи на микрофлору служат:

  1. 1 Инфекции мочевого тракта у беременных;
  2. 2 Подозрение на наличие у пациента пиелонефрита;
  3. 3 Все случаи инфицирования мочевых путей у мужчин;
  4. 4 Вспышки госпитальных урологических инфекций;
  5. 5 Лихорадка при длительной катетеризации мочевого пузыря, а также подозрение на урологическую инфекцию, связанную с проведением медицинской манипуляции (цистоскопии, катетеризации);
  6. 6 Лихорадка выше 38 С без видимых причин у детей в возрастной группе до 3-х лет;
  7. 7 Рецидивирующие мочевые инфекции, неэффективность проводимой ранее эмпирической антимикробной терапии;
  8. 8 Осложненные мочевые инфекции в возрасте старше 65 лет;
  9. 9 Появление симптомов урологической инфекции у лиц с нарушением иммунного статуса, хроническими болезнями почек, сахарным диабетом, врожденными аномалиями строения почек и мочеточников, после операции по трансплантации почки;
  10. 10 Прием больным в течение трех предшествующих месяцев антибактериальных препаратов, что теоретически могло привести к формированию резистентных форм возбудителей.
  1. 1 Женщины в период беременности, после 14 недели, даже в отсутствии каких-либо симптомов патологии, что позволяет снизить риск развития пиелонефрита беременных;
  2. 2 Больные с планируемым проведением хирургического вмешательства на органах мочевыделительной системы;
  3. 3 Пациенты с наличием почечного трансплантата в течение первых двух месяцев после проведения оперативного вмешательства, а далее при любом ухудшении работы трансплантированного органа.

  2. Правила сбора материала

  Как правильно сдавать бакпосев мочи при беременности, у взрослых и детей рассмотрим далее. Для обеспечения точности лабораторной диагностики урологической инфекции важно соблюдение всех этапов диагностики, в том числе и преаналитической ее части – сбора проб мочи и их доставки.

  Именно потребность в определении точного количества бактериальных агентов в исследуемом образце предъявляет особые требования к сбору образцов.

  При проведении исследования в условиях стационара, за подготовку пациента, сбор материала и транспортировку его в лабораторию отвечает средний медицинский персонал стационара. Для таких случаев в лабораториях имеются инструкции в письменной форме, регламентирующие все диагностические этапы.

  При обследовании в амбулаторных условиях, больной производит сбор мочи самостоятельно, без наблюдения медицинского работника. В связи с вышесказанным, необходимо тщательно инструктировать пациента по технике выполнения самостоятельного сбора исследуемого материала, во избежание ложного результата анализа.

  1. 1 Забор мочи необходимо производить в специально предназначенную для этого стерильную одноразовую емкость, которую можно приобрести в аптечной сети. Не допускается забор мочи в нестерильные, ранее бывшие в употреблении контейнеры, баночки или бутылки;
  2. 2 По возможности забор мочи должен производиться до начала приема антибактериальных препаратов или в интервалах между лекарственными курсами, для исключения искажения полученной информации;
  3. 3 Наиболее достоверно исследование средней утренней порции мочи – после ночного сна и до завтрака;
  4. 4 Вечером, накануне сбора мочи рекомендуется по возможности воздержаться от приема мочегонных средств, так как при их приеме происходит разбавление мочи и снижение общего числа бактерий в одном миллилитре;
  5. 5 Для забора мочи у грудничков следует пользоваться специальными детскими мочеприемниками с гипоаллергенным адгезивным средством, собранный образец в последствии переливается в емкость для сбора мочи, маркируется и транспортируется в лабораторию.

  

  Рисунок 1 - Стерильные контейнеры для сбора мочи на анализ (без лопаточки)

  3. Основные этапы самостоятельного забора мочи

  Описанная ниже процедура сбора мочи применяется у всех взрослых, в том числе и беременных женщин. Оптимальный объем мочи для проведения микробиологического анализа составляет примерно 10-20 мл, а минимальный не должен быть менее 1 мл.

  Этапы самостоятельного сбора исследуемого материала можно представить следующим образом:

  1. 1 Тщательно вымыть руки мыльной водой, насухо вытереть их чистым (желательно одноразовым) полотенцем;
  2. 2 Произвести туалет наружных половых органов с использованием теплой мыльной воды, без использования кожных антисептиков, просушить паховую область чистой одноразовой салфеткой;
  3. 3 Открыть заранее подготовленный стерильный контейнер, избегая дотрагиваться пальцами до его внутренних поверхностей;
  4. 4 Выпустить первую порцию мочи, остановить мочеиспускание;
  5. 5 Следующую (среднюю) порцию собрать в подготовленный стерильный контейнер, не касаясь емкостью кожных покровов в паховой области;
  6. 6 Завершить мочеиспускание в унитаз;
  7. 7 Плотно закрыть крышку заполненного контейнера, подписать, прикрепить к контейнеру направление на анализ тонкой резинкой, доставить его в лабораторию.

  Недопустимо использовать для микробиологического исследования мочу из подкладного судна и мочу у женщин в период менструаций.

  Как правильно собрать мочу на бакпосев у ребенка?

  1. 1 Дать ребенку выпить теплой воды или иной жидкости (грудничку можно дать грудь);
  2. 2 Помыть руки мыльной водой, высушить чистым полотенцем;
  3. 3 Произвести туалет наружных половых органов ребенка;
  4. 4 По возможности произвести забор средней порции мочи, усадив ребенка на колени помощника. При невозможности забора средней порции можно воспользоваться специально предназначенным детским мочеприемником, проверять который следует не реже, чем каждые 10 минут.
  5. 5 Нельзя использовать для анализа мочу из горшка.

  

  Рисунок 2 - Сбор мочи у грудного ребенка в стерильный мочеприемник

  4. Правила доставки материала в лабораторию

  Условия доставки образца мочи в лабораторию оказывают прямое влияние на точность проведенного бактериологического исследования, поскольку они могут как снижать жизнеспособность, так и стимулировать размножение бактерий в представленной порции мочи.

  Образец следует доставить в лабораторию не позднее, чем через два часа после забора. Оптимальный срок посева проб мочи составляет менее 30 минут после мочеиспускания, однако в связи с трудностью реализации приведенного условия, данный срок во многих лабораториях регламентируется до 1-2 часов.

  При невозможности осуществления доставки в указанный срок, разрешается хранение материала при температуре не выше +40С в течение суток с момента забора. Замораживать образец мочи запрещено – это приводит к гибели некоторых видов микроорганизмов.

  Для повышения качества исследования, а также для обеспечения более длительного хранения допускается использование специальных стабилизаторов, например, 1% борной кислоты. Однако, добавление таких консервантов допустимо лишь в строго разрешенном объеме.

  В связи с этим, при проведении бактериологического исследования мочи, целесообразно использование коммерческих транспортных систем (спец.пробирок), в которых при добавлении определенного количества мочи достигается определённая концентрация консерванта.

  При наличии специальных тест-систем возможно проведение экспресс-бакпосева, не отходя от постели больного (тест-полоски «Диаслайд», «Дипстрик»), однако в России это мало распространено в связи с дороговизной оборудования.

  Все поступившие в лабораторию образцы мочи обязательно маркируются лаборантом любым доступным способом, позволяющим точно идентифицировать одну пробу от другой.

  Не принимаются на исследование:

  1. 1 Пробы мочи без маркировки и направления;
  2. 2 Пробы без указания даты, времени и метода сбора;
  3. 3 Подвергшиеся хранению более 24 часов от момента доставки;
  4. 4 При нарушенной целостности контейнера для сбора;
  5. 5 Пролитые и открытые образцы.

  5. Техника выполнения

  Российские лаборатории выполняют исследование мочи на микрофлору согласно приказу МЗ №535 от 22.04.1985 года "ОБ УНИФИКАЦИИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ (БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ) МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ"

  За последние несколько лет приказ неоднократно дополнялся и обновлялся.

  В проведении бактериологического посева участвуют врач-бактериолог и лаборант (фельдшер-лаборант). В обязанности врача входит контроль технологии проведения исследования и непосредственное выполнение всех необходимых этапов диагностики.

  Лаборант же отвечает за прием поступивших проб мочи, оформление сопроводительных документов к ним, приготовление необходимых диагностических сред и реагентов, культивирование посева, количественный подсчет выращенных бактериальных колоний, уничтожение расходных материалов и остатков проб.

  Для проведения посева используется несколько типов питательных сред:

  1. 1 Универсальные (кровяной агар, CLED) – поддерживающие рост как грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов;
  2. 2 Дифференциально-диагностические (хромогенные) – используемые для дифференцировки уропатогенов, меняющие цвет при контакте с продуктами их жизнедеятельности;
  3. 3 Селективные (колумбийский агар, агар Эндо, МакКонки) – позволяют отдельно выращивать грамположительные и грамотрицательные возбудители.

  Приобретение питательных сред для культивирования возбудителей происходит в готовом виде или в виде специализированных сухих смесей для самостоятельного приготовления. Для сухих смесей обязательно прилагается инструкция, точно регламентирующая все этапы приготовления.

  Для получения результата бакпосева мочи не секторным методом в чашку Петри, заполненную неселективной средой наносится определенный объем исследуемого материала (в данном случае ровно 1 мкл мочи). Затем в исследуемый образец погружается специальная микробиологическая петля, татированная на соответствующий объем.

  Материал распределяется по поверхности в центральной области в виде нескольких прямых линий, а затем горизонтальными штрихами, перпендикулярными им.

  

  Рисунок 3 - Бакпосев мочи, нанесение материала на питательную среду в чашке Петри

  При использовании метода секторных посевов, чашку Петри заранее делят на 4 равных сектора, обозначенными буквами алфавита. Стерильной петлей выполняется посев мочи в количестве 0,005 мл, поочерёдно в четырех секторах. При переходе в последующий сектор петлю предварительно прожигают.

  Посев мочи на неселективные среды позволяет произвести количественный посев, тогда как селективные среды используются для получения изолированных колоний и первичного определения микроорганизма, поэтому моча наносится на них не мерно.

  Чашки Петри находятся в термостате при температуре 35-37 в течение 18-24 часов, после чего производится подсчет результата. В некоторых случаях (слабый рост флоры, несоответствие результата клинической картине, подозрение на наличие грибов и т.д.) инкубация может быть продлена до 2-х суток.

  При обнаружении роста бактерий с помощью специальных таблиц производится учет всех типов выросших колоний, а также оценивается их возможная патогенность.

  При обнаружении вероятных уропатогенов производится их дальнейшая идентификация с помощью исследования культуральных, биохимических, тинкториальных и агглютинативных свойств, а также определяется степень их чувствительности к антимикробным препаратам.

  6. Определение антибактериальной чувствительности

  Определение чувствительности уропатогенам к антибиотикам производится одним из трех методов, рекомендованных европейским комитетом по антибиотикорезистентности:

  1. 1 Дисковым методом – на поверхность агара в чашке Петри наносят взвесь бактерий заранее известной плотности, затем помещают сверху диски, содержащие определенную концентрацию антибиотика, что приводит к появлению зоны подавления роста бактерий, по диаметру которой судят о чувствительности микроорганизма и определяют минимальную подавляющую концентрацию препарата;
  2. 2 Градиентно-диффузным Е-тестом – метод схож с дисковым, однако вместо антибактериальных дисков используются полоски с Е-тестом, содержащие концентрационный градиент антибиотика от минимума к максимуму. В данном случае также определяется минимальная подавляющая концентрация препарата;
  3. 3 Методом серийных разведений – антибиотик разводится в нескольких, заранее известных концентрациях, после чего вводится в агар для культивирования бактерий. По степени подавления бактериального роста также можно судить о наличии или отсутствии чувствительности к антибиотику.

  7. Интерпретация результатов

  При расшифровке результата бакпосева мочи обязательно учитывается выраженность клинических проявлений урологической инфекции, соблюдение методики забора материала, правил транспортировки и хранении образцов.

  Все виды урологических инфекций можно поделить на моно- и смешанные, протекающие с выделением до двух видов возбудителей.

  При обнаружении в исследуемом материале трех и более патогенов ситуацию рассматривают как признак случайной контаминации (загрязнения) пробы мочи. В этом случае исследование рекомендовано повторить с соблюдением всех этапов забора и диагностики.

  В настоящее время все бактерии, обнаруживаемые в мочевых путях принято делить на три группы, что влияет на их минимально значимый диагностический титр (при посеве 1 мкл):

  • Первичные патогены (кишечная палочка, сальмонеллы, микобактерии, лептоспиры). Эти микроорганизмы являются облигатными патогенами, их минимально значимый диагностический титр более 10х3 КОЕ/мл;
  • Вторичные патогены (энтеробактерии, клебсиеллы, синегнойная палочка, золотистый стафилококк, гемофильная палочка).

  Данные возбудители патогенны лишь в определенных условиях – при ослаблении иммунитета, после инвазивных лечебных процедур, при сопутствующих хронических состояниях более, их минимальный диагностический титр 10х4 КОЕ/мл;

  • Сомнительные патогены (коагулазонегативные стафилококки, стрептококк агалактия, ацинетобактер, Pseudomonas spp, их минимальная диагностическая концентрация более 10х5 КОЕ/мл.

  Выделение представителей нормальной микрофлоры, таких как дифтероиды, гарднереллы, альфа-гемолитические стрептококки не является диагностически значимым.

  8. Причины ложных результатов

  Одной из самых значимых причин появления ложных результатов бактериологического анализа мочи является несоблюдение стандартизированной технологии проведения исследования, в частности:

  1. 1 Увеличение посевной дозы исследуемого материала;
  2. 2 Несоблюдение продолжительности преаналитического периода хранения мочи;
  3. 3 Нарушение норм сбора мочи;
  4. 4 Отсутствие гигиены наружных половых органов перед сбором мочи;
  5. 5 Сбор мочи в неподходящие емкости;
  6. 6 Нарушение температурного режима хранения и транспортировки;
  7. 7 Проведение исследования в период антибиотикотерапии или в период менструаций у женщин;
  8. 8 Несоблюдение времени выдержки материала в термостате.