"क्लिनिकल लेबोरेटरी रिसर्च" (2.84Mb) पुस्तक डाउनलोड करें। प्रोटीन का निर्धारण (एकीकृत ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि) मूत्र के अध्ययन में गुणात्मक हेलर नमूना

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गेलर परीक्षण, ऑस्ट्रियाई के नाम पर पैथोलॉजिस्ट जे.एफ. हेलर, मूत्र में प्रोटीन की गुणात्मक प्रतिक्रिया का एक सामान्य नाम है। परीक्षण की संवेदनशीलता 0.033 g/l है और इसका उपयोग प्रोटीनमेह के नैदानिक ​​निदान में किया जाता है। प्रोटीन का पता लगाने का सिद्धांत एक विकृतीकरण कारक - केंद्रित नाइट्रिक एसिड या लारियोनोवा के अभिकर्मक के प्रभाव में इसके विकृतीकरण पर आधारित है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि एक निश्चित मात्रा में प्रोटीन हमेशा मूत्र में मौजूद होता है, लेकिन, एक नियम के रूप में, एक स्वस्थ व्यक्ति के मूत्र में इसकी एकाग्रता गुणात्मक प्रतिक्रिया की संवेदनशीलता सीमा से नीचे होती है और सरल तरीकों से इसका पता नहीं लगाया जाता है। 0.033 g/l से अधिक प्रोटीन की मात्रा के लिए, नमूना उपयुक्त नहीं है। उच्च सांद्रता में मूत्र को पतला करें या एस्बैक एल्ब्यूमिनोमीटर का उपयोग करें।

मूत्र में कुल प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए, गेलर परीक्षण पर आधारित एक विधि का उपयोग किया जाता है - ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि (डब्ल्यू। रॉबर्ट्स, 1830-1899, अंग्रेजी चिकित्सक)। तकनीक में नमूने की संवेदनशीलता की निचली सीमा (0.033 ग्राम / एल) और 2-3 मिनट के रिंग गठन के समय में मूत्र का पतला होना शामिल है।

विश्लेषण प्रगति

अभिकर्मक: केंद्रित (फ्यूमिंग) नाइट्रिक एसिड या लारियोनोवा अभिकर्मक। परीक्षण के लिए मूत्र स्पष्ट और अम्लीय होना चाहिए।

लारियोनोवा अभिकर्मक की तैयारी

सोडियम क्लोराइड का एक संतृप्त घोल तैयार करें (100 मिलीलीटर गर्म पानी में 30-30 ग्राम नमक घोलें, ठंडा होने तक खड़े रहने दें)। सतह पर तैरनेवाला त्याग दिया जाता है और फ़िल्टर किया जाता है। छानने के 99 मिलीलीटर में 1 मिलीलीटर केंद्रित नाइट्रिक एसिड जोड़ें (आप हाइड्रोक्लोरिक एसिड के 2 मिलीलीटर की जगह ले सकते हैं)।

अनुसंधान तकनीक

लगभग समान मात्रा में मूत्र को दीवार के साथ एक परखनली में 1-2 मिली अभिकर्मक के साथ सावधानी से बिछाया जाता है। प्रोटीन की उपस्थिति में, लगभग 2-3 मिनट के बाद, तरल पदार्थों के बीच इंटरफेस में मैलापन देखा जाता है - विकृत प्रोटीन की एक सफेद अंगूठी।

न्यूक्लियोएल्ब्यूमिन या यूरेट लवण की उच्च सांद्रता के कारण नाइट्रिक एसिड का उपयोग करते समय एक गलत सकारात्मक परिणाम हो सकता है। पहले मामले में, ट्यूब के थोड़ा हिलने पर यह गायब हो जाता है, और दूसरे मामले में, रिंग मीडिया के बीच के इंटरफेस की तुलना में बहुत अधिक स्थित होता है और गर्म होने पर गायब हो जाता है; पतला मूत्र के साथ परीक्षण दोहराते समय, अंगूठी नहीं बनती है। कभी-कभी नाइट्रिक एसिड के साथ यूरोक्रोम के ऑक्सीकरण से एक भूरा रंगद्रव्य वलय भी दिखाई देता है।

नाइट्रिक एसिड के विपरीत, लैरियोनिक अभिकर्मक के उपयोग के कई फायदे हैं: रंगद्रव्य के छल्ले लेयरिंग सीमा पर नहीं बनते हैं, और एक सकारात्मक परिणाम स्पष्ट प्रोटीन रिंग देता है।

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गेलर टेस्ट की विशेषता वाला एक अंश

मैं उनके लिए, अपने लिए, और उन सभी लोगों के लिए बेतहाशा आहत और दुखी था, जो अभी भी यह मानते थे कि वे कुछ बदल सकते हैं ... युद्ध?
अचानक मेरे सामने एक और तस्वीर आ गई...
उसी छोटे पत्थर "कोशिका" में, जहां मैग्डलीन का खून से सना शरीर अभी भी फर्श पर पड़ा था, उसके मंदिर के शूरवीर उसके चारों ओर खड़े थे, घुटने टेककर ... वे सभी असामान्य रूप से सफेद - बर्फ-सफेद लंबे कपड़े पहने हुए थे . वे मगदलीनी के चारों ओर खड़े थे, अपने घमंडी सिरों को नीचे कर रहे थे, और उनके कठोर, डरे हुए चेहरों से आंसू बह रहे थे ... सबसे पहले उठने वाले मैगस थे, जिनका दोस्त जॉन कभी था। उसने सावधानी से, जैसे कि खुद को चोट पहुंचाने से डरते हुए, अपनी उंगलियों को घाव में डुबो दिया, और खून से लथपथ हाथ से उसकी छाती पर खूनी क्रॉस जैसा कुछ खींच लिया ... दूसरे ने भी ऐसा ही किया। इसलिए वे बारी-बारी से उठे, और श्रद्धापूर्वक अपने हाथों को पवित्र रक्त में डुबोते हुए, अपने बर्फ-सफेद वस्त्रों पर लाल क्रॉस खींचे ... मुझे लगा कि मेरे बाल सिरे पर खड़े होने लगे हैं। यह किसी तरह के भयानक अनुष्ठान की तरह था, जिसे मैं अभी भी समझ नहीं पाया...
"वे ऐसा क्यों कर रहे हैं, सेवर?.." मैंने चुपचाप पूछा, जैसे कि डर है कि वे मुझे सुनेंगे।
"यह एक शपथ है, इसिडोरा। शाश्वत प्रतिशोध की शपथ... उन्होंने मगदलीनी के खून की शपथ ली - उनके लिए सबसे पवित्र रक्त - उसकी मौत का बदला लेने के लिए। यह तब से था जब मंदिर के शूरवीरों ने लाल क्रॉस के साथ सफेद लबादा पहना था। केवल बाहरी लोगों में से लगभग कोई भी कभी भी उनका सही अर्थ नहीं जानता था ... और किसी कारण से हर कोई बहुत जल्दी "भूल गया" कि मैग्डलीन की मृत्यु से पहले मंदिर के शूरवीरों ने साधारण गहरे भूरे रंग के चौग़ा पहने थे, न कि किसी भी क्रॉस के साथ "सजाया"। मंदिर के शूरवीरों, कैथरों की तरह, इस अर्थ में क्रॉस से नफरत करते थे कि ईसाई चर्च इसे "श्रद्धा" देता है। वे उसे हत्या का एक नीच और दुष्ट साधन, मृत्यु का एक साधन मानते थे। और मैग्डलीन के खून से उन्होंने अपनी छाती पर जो चित्रित किया, उसका बिल्कुल अलग अर्थ था। यह सिर्फ इतना है कि चर्च ने अपनी जरूरतों के अनुरूप मंदिर के शूरवीरों के अर्थ को पूरी तरह से "फिर से तैयार" किया, जैसे कि रेडोमिर और मैग्डेलेना से संबंधित बाकी सब कुछ ...।
उसी तरह, उसकी मृत्यु के बाद, उसने सार्वजनिक रूप से मृतक मैग्डलीन को एक सड़क महिला के रूप में घोषित किया ...
- मसीह के बच्चों और मगदलीनी से उसकी शादी से भी इनकार किया ...
- उन दोनों को "मसीह के विश्वास के नाम पर" भी नष्ट कर दिया, जिसके साथ वे दोनों जीवन भर जमकर लड़े ...
- क़तर को भी नष्ट कर दिया, मसीह के नाम का उपयोग करके ... उस व्यक्ति का नाम जिसकी आस्था और ज्ञान उन्होंने सिखाया ...
- उसने टेम्पलर्स (मंदिर के शूरवीरों) को भी नष्ट कर दिया, उन्हें शैतान के मिनियन घोषित कर दिया, उनके कामों पर निंदा और कीचड़ उछाला, और खुद मास्टर को अभद्रता की, जो रेडोमिर और मैग्डलीन के प्रत्यक्ष वंशज थे ...
रोम के "सबसे पवित्र" शैतानों की नीचता और क्षुद्रता को इंगित करने वाले सभी लोगों से छुटकारा पाने के बाद, ईसाई चर्च ने एक किंवदंती बनाई, जिसे "निर्विवाद साक्ष्य" द्वारा मज़बूती से पुष्टि की गई थी, जिसे किसी ने कभी किसी कारण से सत्यापित नहीं किया था, और जो कुछ हो रहा है उसके बारे में सोचने के बावजूद यह कभी किसी को नहीं हुआ।

तनुकरण विधि द्वारा मूत्र में प्रोटीन सांद्रता का निर्धारण।

आर-यू 50% नाइट्रोजन का घोल टू-यू या पी-लारियोनिक। निर्धारण का क्रम: एक तिपाई में कई परखनलियाँ रखी जाती हैं और 1 मिली नाइट्रिक एसिड घोल डाला जाता है, 1 मिली मूत्र, अभिकर्मक पर परत डालें और समय नोट करें, जब एक अंगूठी दिखाई देती है, तो हम समय रिकॉर्ड करते हैं अंगूठी की उपस्थिति। यदि वलय चौड़ा है, तो मूत्र को पतला करें।

4. 3% सल्फ़ोसैलिसिलिक एसिड के साथ मूत्र में प्रोटीन सांद्रता का निर्धारण।

समाधान: 3% एससी, सोडियम क्लोराइड 9%, पीपी एल्ब्यूमिन 10%। निर्धारण की प्रगति: 1.25 मिलीलीटर स्पष्ट मूत्र को दो मापा अपकेंद्रित्र ट्यूब "ओ" - अनुभव और "के" - नियंत्रण में रखा जाता है। सल्फोसैलिसिलिक एसिड के 3% समाधान के 3.75 मिलीलीटर को प्रयोगात्मक में जोड़ा जाता है, और सोडियम क्लोराइड के 0.9% समाधान के 3.75 मिलीलीटर को नियंत्रण में जोड़ा जाता है। 5 मिनट के लिए छोड़ दें, और फिर एफईसी पर 590-650 एनएम (नारंगी या लाल बत्ती फिल्टर) की तरंग दैर्ध्य पर नियंत्रण के खिलाफ 5 मिमी प्रयोग की परत मोटाई के साथ एक क्युवेट में फोटोमेट्री। गणना अंशांकन ग्राफ या तालिका के अनुसार की जाती है। विधि सिद्धांतयह इस तथ्य पर आधारित है कि सल्फोसैलिसिलिक एसिड वाला प्रोटीन मैलापन देता है, जिसकी तीव्रता प्रोटीन की सांद्रता के सीधे आनुपातिक होती है।

5. मूत्र में ग्लूकोज का पता लगाना, गेनेस-अकिमोव परीक्षण। सिद्धांतग्लूकोज, जब एक क्षारीय माध्यम में गर्म किया जाता है, तो कॉपर डाइहाइड्रॉक्साइड (पीला) को कॉपर मोनोहाइड्रॉक्साइड (नारंगी-लाल) में बदल देता है। अभिकर्मक तैयारी: 1) 13.3 ग्राम रसायन। शुद्ध क्रिस्टलीय कॉपर सल्फेट (CuSO 4 .) . 5 एच 2 ओ) समाधान। 400 मिली पानी में। 2) 50 ग्राम कास्टिक सोडा 400 मिली पानी में घोला जाता है। 3) 15 ग्राम शुद्ध ग्लिसरीन 200 मिलीलीटर पानी में पतला होता है। पहला और दूसरा घोल मिलाएं और तुरंत तीसरा घोल डालें। अभिकर्मक रैक। परिभाषा प्रगति: मूत्र की 1 बूंद और अभिकर्मक की 9 बूंदें परखनली में डाली जाती हैं और 1-2 मिनट के लिए पानी के स्नान में उबाला जाता है। सकारात्मक परीक्षण: तरल या अवक्षेप का पीला या नारंगी रंग।

6. ग्लूकोज ऑक्सीडेज विधि द्वारा मूत्र में ग्लूकोज का गुणात्मक निर्धारण। विधि सिद्धांतप्रतिक्रिया के अनुसार ग्लूकोज ऑक्सीडेज की उपस्थिति में ग्लूकोज का ऑक्सीकरण होता है: ग्लूकोज + ओ 2 ग्लाइकोनोलेंट + एच 2 ओ 2 के साथ। पेरोक्सीडेज की कार्रवाई के तहत गठित पेरोक्साइड एच एक रंगीन उत्पाद के गठन के साथ सब्सट्रेट को ऑक्सीकरण करता है।

डालें और 15 मिनट के लिए 37 0 C पर इनक्यूबेट करें। CPK, 5mm क्युवेट को देखें।

फिर, गणना सूत्र के अनुसार की जाती है: op = Ext op . सीएसटी / एक्ट सेंट।

7. लेस्ट्रेड परीक्षण द्वारा मूत्र में कीटोन निकायों का पता लगाना।कांच की स्लाइड पर (स्केलपेल की नोक पर) लेस्ट्रेड घोल का एक पाउडर या एक टैबलेट लगाया जाता है, और उस पर मूत्र की 2-3 बूंदें डाली जाती हैं। कीटोन निकायों की उपस्थिति में, गुलाबी से बैंगनी रंग दिखाई देगा। नमूने का मूल्यांकन एक सफेद पृष्ठभूमि पर किया जाता है।

8. एमिडोपाइरिन के 5% अल्कोहल घोल के साथ एक परीक्षण द्वारा मूत्र में रक्त वर्णक का पता लगाना।

एमिडोपाइरिन का 1.5% अल्कोहल घोल (0.5 ग्राम एमिडोपाइरिन 96% अल्कोहल के 10 मिली में घुल जाता है) 2.3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड का 1.5 ग्राम हाइड्रोपाइराइट का घोल 50 मिली पानी में घोल दिया जाता है) -ईथर का अर्क या हिला हुआ अनफ़िल्टर्ड मूत्र। 8- जोड़ें 5% एमिडोपाइरिन घोल की 10 बूँदें और 3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड घोल की 8-10 बूँदें; परिणाम को 2-3 मिनट के बाद ध्यान में रखें। ग्रे-वायलेट धुंधला होने की उपस्थिति में नमूना को सकारात्मक माना जाता है।

एक न्यूबॉयर परीक्षण के साथ मूत्र में यूरोबिलिन का पता लगाना।

एर्लिच के अभिकर्मक के साथ यूरोबिलिनोजेन की रंग प्रतिक्रिया के आधार पर, जिसमें 2 ग्राम पैराडाइमिथाइलैमिनोबेनाल्डिहाइड और 100 मिलीलीटर हाइड्रोक्लोरिक एसिड समाधान (200 ग्राम) होता है। 1 मिलीलीटर मूत्र और 1 मिलीलीटर समाधान। पहले 30 सेकंड में लाल रंग की उपस्थिति यूरोबिलिनोजेन सामग्री में वृद्धि को इंगित करता है। आम तौर पर, रंग बाद में दिखाई देता है या पूरी तरह से अनुपस्थित होता है। जब मूत्र खड़ा होता है, तो यूरोबिलिनोजेन यूरोबिलिन में बदल जाता है और परीक्षण गलत नकारात्मक हो सकता है। गर्म नहीं किया जा सकता है, क्योंकि उप-उत्पाद जटिल यौगिक, पोर्फिरिन के साथ एल्डिहाइड, इंडोल और औषधियां बन सकती हैं।

रोसिन परीक्षण के साथ मूत्र में बिलीरुबिन का पता लगाना।

आयोडीन का मादक घोल (10g.l): 1 ग्राम क्रिस्टलीय आयोडीन को 100 मिली की क्षमता वाले सिलेंडर में 96 ग्राम रेक्टिफाइड अल्कोहल के 20-30 मिली में घोल दिया जाता है, और फिर शराब के साथ निशान तक ऊपर कर दिया जाता है। परीक्षण मूत्र के 4-5 मिलीलीटर एक रासायनिक परखनली में डालें और ध्यान से उस पर आयोडीन का एक अल्कोहल घोल डालें (यदि मूत्र का घनत्व कम है, तो इसे आयोडीन के अल्कोहल घोल पर रखना चाहिए)। एंटीपायरिन, साथ ही जब मूत्र में रक्त वर्णक होता है, तो परीक्षण सकारात्मक हो जाता है। स्वस्थ व्यक्ति में, यह परीक्षण नकारात्मक होता है।

शुष्क रसायन विज्ञान (एकाधिकार परीक्षण) द्वारा मूत्र परीक्षण।

सिद्धांत। विधि बफर समाधान में संकेतक के रंग पर प्रोटीन द्वारा लगाए गए प्रभाव पर आधारित है, जिसके परिणामस्वरूप डाई का रंग पीले से नीले रंग में बदल जाता है।

जब मूत्र में प्रोटीन की उपस्थिति का परीक्षण किया जाता है और संकेतक पेपर का उपयोग करके पीएच का निर्धारण किया जाता है, तो यह अनुशंसा की जाती है कि निम्नलिखित दिशानिर्देशों का पालन किया जाए:

1. अच्छी तरह से धोए गए बर्तन में मूत्र एकत्र करें।
2. ताजा एकत्र, परिरक्षक मुक्त मूत्र का प्रयोग करें।
3. कागज के संकेतक स्ट्रिप्स की आवश्यक संख्या को हटाने के बाद मामले को ध्यान से बंद करें।
4. संकेतक क्षेत्रों को अपनी उंगलियों से न पकड़ें।
5. केवल लेबल पर बताई गई समाप्ति तिथि के भीतर ही उपयोग करें।
6. संकेतक पेपर के भंडारण के नियमों का पालन करें।
7. निर्देशों में उपलब्ध निर्देशों के अनुसार परिणामों का मूल्यांकन करें।

शुष्क मूत्र रसायन विश्लेषक पर मूत्र परीक्षण करना।

परिभाषा प्रगति. संकेतक पेपर की एक पट्टी को मामले से हटा दिया जाता है और परीक्षण मूत्र में डुबो दिया जाता है ताकि दोनों संकेतक क्षेत्र एक साथ सिक्त हो जाएं। 2-3 सेकंड के बाद, पट्टी को एक सफेद कांच की प्लेट पर रख दिया जाता है। पेंसिल केस पर मुद्रित रंग स्केल का उपयोग करके तुरंत पीएच मूल्यांकन करें। रंग पैमाने पर पीएच मान 6.0 (या उससे कम) से मेल खाता है; 7.0; 8.0; 9.0.

मूत्र की तैयारी, सूक्ष्म परीक्षण द्वारा मूत्र तलछट से तैयार करना अनुमानित तरीके से।

ल्यूकोसाइटुरिया और हेमट्यूरिया की डिग्री के अधिक सटीक मूल्यांकन के लिए सामान्य विश्लेषण और आकार के तत्वों की मात्रात्मक गणना में मूत्र तलछट की सूक्ष्म जांच की जाती है।

माइक्रोस्कोपी के लिए मूत्र तलछट तैयार करने के नियम।

मूत्र का पहला सुबह का हिस्सा सूक्ष्म जांच के अधीन है।

प्रारंभिक मिश्रण के बाद, 10 मिलीलीटर मूत्र लिया जाता है, 1500 आरपीएम पर 10 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है।

फिर मूत्र के साथ अपकेंद्रित्र ट्यूब को तेज गति से उलट दिया जाता है, सतह पर तैरनेवाला जल्दी से एक खाली जार में डाल दिया जाता है।

हिलाओ, एक गिलास स्लाइड पर एक बूंद रखें और ध्यान से एक कवरस्लिप के साथ कवर करें।

यदि अवक्षेप में कई परतें होती हैं, तो तैयारी तैयार करें, और फिर अपकेंद्रित्र करें और प्रत्येक परत से अलग से तैयारी तैयार करें।

आंख को दिखाई देने वाली तलछट की अनुपस्थिति में, मूत्र की एक बूंद को कांच की स्लाइड पर और सूक्ष्म रूप से लगाया जाता है।

शुरुआत में, सामग्री की जांच कम आवर्धन (आइपीस 7-10, उद्देश्य 8) पर की जाती है, जबकि कंडेनसर को नीचे किया जाता है, डायाफ्राम को थोड़ा संकुचित किया जाता है, फिर उच्च आवर्धन पर तैयारी का विस्तार से अध्ययन किया जाता है (ऐपिस 10.7; उद्देश्य 40) .

14.नेचिपोरेंको के अनुसार मूत्र तलछट का मात्रात्मक अध्ययन।

विधि का उपयोग अव्यक्त सुस्त भड़काऊ प्रक्रियाओं (पायलोनेफ्राइटिस, ग्लोमेरुलोनेफ्राइटिस), अव्यक्त पायरिया के लिए किया जाता है। गतिकी में रोग प्रक्रिया का अध्ययन करना। उपचार की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए। विधि के लाभ:तकनीकी रूप से सरल, बड़ी मात्रा में मूत्र की आवश्यकता नहीं होती है और यह लंबे समय तक चलने वाला होता है। इसका भंडारण, आउट पेशेंट अभ्यास में प्रयोग किया जाता है। अनिवार्य शर्तें: सुबह का मूत्र, मध्यम भाग, अम्लीय घोल (क्षारीय में कोशिकीय तत्वों का आंशिक विघटन हो सकता है)। 1. मूत्र मिलाया जाता है। 2. 10 मिली मूत्र को मापने वाली अपकेंद्रित्र ट्यूब में रखा जाता है और 1500 आरपीएम पर 10 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। 3. सेंट्रीफ के बाद। अनुभवहीन तरल के शीर्ष पिपेट, छोड़ दो। ठीक 1 मिली तलछट। 4. अवक्षेप को अच्छी तरह मिलाया जाता है और गोरीव कक्ष भर दिया जाता है। 5. भरने के 3-5 मिनट बाद, वे आकार के तत्वों को गिनना शुरू करते हैं। 6. ल्यूकोसाइट्स, एर, सिलिंडर की एक ऐपिस के साथ गिनती 15 उद्देश्य 8 जब कम हो। संघनित्र, 100 बड़े कक्ष वर्गों में। श्वेत रक्त कोशिकाओं, एर को अलग से गिना जाता है, सिलेंडर (कम से कम 4 गोरियाव कक्षों की गिनती) उत्सर्जित होते हैं। अरिथ एक्स \u003d ए एक्स 0.25x 10 6 / एल। आदर्श: झील। 2-4x 10 6 /l, 1 x 10 6 /l तक Er, 0.02 x 10 6 /l तक के सिलेंडर (4 कक्षों के लिए एक)। बच्चों में: ल्यूक। 2-4x 10 6 /l तक, Er तक 0.75 x 10 6 /l, सिलेंडर 0.02 x 10 6 /l तक।

15. ज़िम्नित्सकी के अनुसार यूरिनलिसिस

यह परीक्षण गुर्दे की ध्यान केंद्रित करने की क्षमता को निर्धारित करता है। और मूत्र को पतला करें। नमूने का सार दिन के दौरान भागों में तीन घंटे में सापेक्ष घनत्व और मूत्र की मात्रा के गतिशील निर्धारण में। परीक्षण करना: सुबह 6 बजे मूत्राशय को शौचालय में खाली करने के बाद, रोगी दिन में अलग-अलग जार में हर तीन घंटे में मूत्र एकत्र करता है। केवल 8 सर्विंग्स। अनुसंधान प्रगति: 1. वितरण। मूत्र को घंटे के अनुसार व्यवस्थित किया जाता है और प्रत्येक भाग में मात्रा और सापेक्ष घनत्व निर्धारित किया जाता है। 2. निर्धारित करने के लिए मूत्र की दैनिक मात्रा और तरल पेय की मात्रा की तुलना करें। इसके उत्सर्जन का%। 3. दिन और रात के ड्यूरिसिस की गणना करें, सारांशित करें, दैनिक ड्यूरिसिस प्राप्त करें। 4. मात्रा और सापेक्ष की उतार-चढ़ाव सीमा निर्धारित करें। प्रति दिन मूत्र घनत्व यानी सबसे छोटे हिस्से और सबसे बड़े हिस्से में क्या अंतर है। प्रदर्शन। स्वास्थ्य परीक्षण। लोग: 1. दैनिक मूत्रल 800-1500 मिली। 2. दिन में डायरिया रात में काफी प्रबल होता है। 3. अलग-अलग हिस्सों में मूत्र की मात्रा में उतार-चढ़ाव महत्वपूर्ण हैं (50 से 400 मिलीलीटर तक)। 4. उतार-चढ़ाव p 1.003 से 1.028 तक, 0.008 से अधिक होना चाहिए। फंक के साथ। गुर्दे की विफलता: हाइपोस्टेनुरिया, हाइपोइसोस्टेनुरिया, आइसोस्टेनुरिया, हाइपरस्टेनुरिया, ओलिगुरिया, औरिया, नोक्टुरिया।

16. मल के सामान्य गुणों का विवरण।

आम तौर पर, मल में पाचन तंत्र के स्राव और उत्सर्जन के उत्पाद, अपचित या आंशिक रूप से पचने वाले खाद्य पदार्थों के अवशेष और माइक्रोबियल वनस्पतियां शामिल होती हैं। मल की मात्रा 100-150 ग्राम है। स्थिरता घनी है। आकार बेलनाकार है। गंध मल सामान्य है। भूरा रंग। आर-टियन तटस्थ, थोड़ा क्षारीय या थोड़ा अम्लीय (पीएच 6.5-7.0-7.5) है। बलगम अनुपस्थित है। रक्त अनुपस्थित है। अपचित भोजन के अवशेष अनुपस्थित होते हैं।

ईएसआर की परिभाषा।

सोडियम साइट्रेट का जलीय घोल 5%, रक्त की मात्रा 1:4। एक पूरी रक्त केशिका एकत्र की जाती है और सोडियम साइट्रेट (25 डिवीजन) के साथ मिश्रित होती है। 1 घंटे के लिए पंचेकोव तंत्र में रखें। नोर्मा पति। 2-10 मिमी / घंटा, महिला 2-15 मिमी / घंटा। त्वरित ईएसआर-इन्फ। सूजन प्रक्रियाओं, ल्यूकेमिया, दुर्दमता। रसौली। ईएसआर को धीमा करना - एल्ब्यूमिन, पित्त एसिड की सामग्री में वृद्धि।

रक्त स्मीयरों का निर्धारण।

रक्त कोशिकाओं को पेंट में निहित पानी के प्रभाव से बचाता है, जिसके प्रभाव में गैर-निश्चित तैयारी में एरिथ्रोसाइट्स का हेमोलिसिस होता है और ल्यूकोसाइट्स की आकृति विज्ञान बदल जाता है। लगानेवाला भी प्रोटीन को जमने का कारण बनता है और स्मीयर को स्लाइड पर सुरक्षित करता है। फिक्सेटिव्स: मिथाइल अल्कोहल (3-5 मिनट), मे-ग्रुनवल्ड इओसिनमेथिलीन नीला घोल, एथिल अल्कोहल 960 (30 मिनट), क्लोरोफॉर्म (कुछ सेकंड), फॉर्मेलिन (1 मिनट), निकिफोरोव का मिश्रण (20 मिनट)। निर्धारण विशेष कंटेनरों में किया जाता है, उन्हें एक फिक्सेटर के साथ एक क्युवेट में कम किया जाता है।

मूत्र गेलर परीक्षण में प्रोटीन का पता लगाना।

आर-यू 50% नाइट्रिक एसिड, आर-लारियन। 1-1.5 मिलीलीटर नाइट्रिक एसिड या लैरियन अभिकर्मक और 1-1.5 मिलीलीटर मूत्र की एक टेस्ट ट्यूब में निर्धारण का कोर्स दीवार के साथ डाला जाता है, प्रोटीन की उपस्थिति में एक सफेद अंगूठी दिखाई देगी, नमूने की भावना 0.033 है जी / एल। 2-3 मिनट के बाद रिंग का दिखना

2. मूत्र में 20% सल्फ़ोसैलिसिलिक एसिड के साथ प्रोटीन का पता लगाना।

आर-इन: घोल 20% ssk: 20 ग्राम ssk 70 मिली पानी में घोलकर 100 मिली तक टॉप किया जाता है। निर्धारण के दौरान: 2 परखनली में कमजोर अम्लीय मूत्र अपकेंद्रित्र के 2-3 मिलीलीटर डालें, 1 परखनली में ssk घोल की 3-4 बूंदें डालें, 2 मिलीलीटर पानी को 2 परखनली में डालें। अभिकर्मक के साथ परखनली में प्रोटीन की उपस्थिति में, मैलापन प्रकट होता है या गुच्छे दिखाई देते हैं, नियंत्रण ट्यूब पारदर्शी रहती है। इस नमूने में प्रोटीन की न्यूनतम मात्रा 0.015 g/l है।

दैनिक मूत्र में थोड़ी मात्रा में प्रोटीन भी काफी स्वस्थ व्यक्तियों में पाया जाता है, हालांकि, वर्तमान में उपयोग की जाने वाली विधियों द्वारा एकल भागों में ऐसी छोटी सांद्रता का पता नहीं लगाया जाता है। लगभग 70% स्वस्थ मानव मूत्र प्रोटीन यूरोमुकोइड होते हैं, एक प्रोटीन जो गुर्दे के ऊतकों का एक उत्पाद है; इस प्रकार, स्वस्थ लोगों के मूत्र में ग्लोमेरुलर प्रोटीन का अनुपात नगण्य होता है और प्रोटीनुरिया सामान्य रूप से 50-150 मिलीग्राम / दिन होता है, जिसमें अधिकांश मूत्र प्रोटीन सीरम के समान होते हैं।

यह घटना के स्थान के आधार पर प्रोटीनूरिया के निम्नलिखित रूपों को अलग करने के लिए प्रथागत है: प्रीरेनल, ऊतक प्रोटीन टूटने में वृद्धि, हेमोलिसिस का उच्चारण; गुर्दे, गुर्दे की विकृति के कारण, जिसे ग्लोमेरुलर और ट्यूबलर में विभाजित किया जा सकता है; पोस्टरेनल, मूत्र पथ के विकृति के साथ जुड़ा हुआ है और सबसे अधिक बार सूजन के कारण होता है।

अस्तित्व की अवधि के आधार पर, स्थायी प्रोटीनुरिया अलग-थलग होता है, जो कई हफ्तों और वर्षों तक मौजूद रहता है, और क्षणिक, समय-समय पर प्रकट होता है, कभी-कभी गुर्दे की विकृति की अनुपस्थिति में भी, उदाहरण के लिए, बुखार और गंभीर नशा के साथ।
प्रोटीनमेह की परिवर्तनशीलता के बीच अंतर करना उचित है: 1 ग्राम तक की दैनिक प्रोटीन हानि के साथ - मध्यम, 1 से 3 ग्राम तक - मध्यम और 3 ग्राम से अधिक - स्पष्ट।

मूत्र में अपेक्षाकृत बड़े आणविक भार वाले प्रोटीन का पता लगाना वृक्क फिल्टर की चयनात्मकता की अनुपस्थिति और इसके स्पष्ट नुकसान को इंगित करता है। इन मामलों में, कोई प्रोटीनमेह की कम चयनात्मकता की बात करता है। इसलिए, वर्तमान में, मूत्र के प्रोटीन अंशों की परिभाषा व्यापक हो गई है। स्टार्च और पॉलीएक्रिलामाइड जेल में वैद्युतकणसंचलन के सबसे सटीक तरीके। इन विधियों द्वारा प्राप्त परिणामों के अनुसार, प्रोटीनमेह की चयनात्मकता का न्याय करना संभव है।

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने के लिए अधिकांश गुणात्मक और मात्रात्मक तरीके मूत्र की मात्रा में या मीडिया (मूत्र और एसिड) के इंटरफेस पर इसके जमाव पर आधारित होते हैं; यदि जमावट की तीव्रता को मापने का कोई तरीका है, तो नमूना मात्रात्मक हो जाता है।

सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ मानकीकृत परीक्षण:

आवश्यक अभिकर्मक:

सल्फोसैलिसिलिक एसिड का 20% घोल।

अनुसंधान प्रगति:

3 मिलीलीटर फ़िल्टर्ड मूत्र को 2 ट्यूबों में डाला जाता है।
परखनली में अभिकर्मक की 6-8 बूंदें डालें। एक अंधेरे पृष्ठभूमि पर, नियंत्रण ट्यूब की प्रयोगात्मक एक के साथ तुलना करें। टेस्ट ट्यूब में मैलापन प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करता है, नमूना सकारात्मक माना जाता है।

यदि मूत्र की प्रतिक्रिया क्षारीय है, तो अध्ययन से पहले इसे एसिटिक एसिड के 10% घोल की 2-3 बूंदों से अम्लीकृत किया जाता है।

यूनिफाइड ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि:

विधि हेलर रिंग टेस्ट पर आधारित है, जिसमें यह तथ्य शामिल है कि नाइट्रिक एसिड और मूत्र की सीमा पर, प्रोटीन की उपस्थिति में, इसका जमावट होता है और एक सफेद अंगूठी दिखाई देती है।

आवश्यक अभिकर्मक:

नाइट्रिक एसिड (सापेक्ष घनत्व 1.2) या लारियोनोवा के अभिकर्मक का 30% समाधान। लारियोनोवा के अभिकर्मक की तैयारी: 20-30 ग्राम सोडियम क्लोराइड को 100 मिलीलीटर आसुत जल में गर्म करके ठंडा किया जाता है, फ़िल्टर किया जाता है। छानना के 99 मिलीलीटर में 1 मिलीलीटर केंद्रित नाइट्रिक एसिड मिलाया जाता है।

अनुसंधान प्रगति:

1-2 मिली नाइट्रिक एसिड (या लारियोनोवा के अभिकर्मक) को परखनली में डाला जाता है और उतनी ही मात्रा में फ़िल्टर किए गए मूत्र को परखनली की दीवार के साथ सावधानी से बिछाया जाता है।
2 से 3 मिनट के बीच दो तरल पदार्थों के बीच इंटरफेस में एक पतली सफेद अंगूठी की उपस्थिति लगभग 0.033 ग्राम/ली की एकाग्रता पर प्रोटीन की उपस्थिति को इंगित करती है। यदि परत लगाने के 2 मिनट से पहले अंगूठी दिखाई देती है, तो मूत्र को पानी से पतला किया जाना चाहिए और पहले से ही पतला मूत्र की बार-बार परत की जानी चाहिए। मूत्र के कमजोर पड़ने की डिग्री का चयन रिंग के प्रकार के आधार पर किया जाता है, अर्थात। इसकी चौड़ाई, कॉम्पैक्टनेस और उपस्थिति का समय। 2 मिनट से पहले दिखाई देने वाली एक फ़िलीफ़ॉर्म रिंग के साथ, मूत्र को 2 बार पतला किया जाता है, एक चौड़े के साथ - 4 बार, एक कॉम्पैक्ट के साथ - 8 बार, आदि। फिर प्रोटीन सांद्रता की गणना 0.033 को कमजोर पड़ने की डिग्री से गुणा करके की जाती है और ग्राम प्रति 1 लीटर (जी / एल) में व्यक्त की जाती है।

कभी-कभी बड़ी मात्रा में यूरेट की उपस्थिति में एक सफेद वलय प्राप्त होता है। प्रोटीन रिंग के विपरीत, यूरेट रिंग दो तरल पदार्थों के बीच की सीमा से थोड़ा ऊपर दिखाई देती है और कोमल हीटिंग के साथ घुल जाती है।

सल्फोसैलिसिलिक एसिड के अतिरिक्त द्वारा गठित मैलापन द्वारा मूत्र में प्रोटीन का मात्रात्मक निर्धारण:

विधि सिद्धांत:

सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ प्रोटीन जमावट के दौरान मैलापन की तीव्रता इसकी एकाग्रता के समानुपाती होती है।

आवश्यक अभिकर्मक:

1.
सल्फोसैलिसिलिक एसिड का 3% घोल।

2. 0.9% सोडियम क्लोराइड घोल।

3. एल्बुमिन मानक घोल - 1% घोल (1 मिली घोल जिसमें 10 मिलीग्राम एल्ब्यूमिन होता है): 1 ग्राम लियोफिलाइज्ड एल्ब्यूमिन (मानव या गोजातीय सीरम से) 0.9% सोडियम क्लोराइड घोल की थोड़ी मात्रा में एक फ्लास्क में घोल दिया जाता है। 100 मिली, और फिर उसी घोल से निशान तक पतला करें। 5% सोडियम एजाइड घोल (NaN3) का 1 मिली मिला कर अभिकर्मक को स्थिर किया जाता है। जब रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है, तो अभिकर्मक 2 महीने के लिए अच्छा होता है।

विशेष उपकरण - फोटोइलेक्ट्रिक वर्णमापी।

अनुसंधान प्रगति:

फ़िल्टर किए गए मूत्र के 1.25 मिलीलीटर को टेस्ट ट्यूब में जोड़ा जाता है, मिश्रित सल्फोसैलिसिलिक एसिड के 3% समाधान के साथ 5 मिलीलीटर तक। 5 मिनट के बाद, इसे 5 मिमी की ऑप्टिकल पथ लंबाई वाले क्युवेट में नियंत्रण के विरुद्ध 590-650 एनएम (नारंगी या लाल बत्ती फिल्टर) के तरंग दैर्ध्य पर एक फोटोइलेक्ट्रोक्लोरिमीटर पर मापा जाता है। टेस्ट ट्यूब एक नियंत्रण के रूप में कार्य करता है, जिसमें 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान 1.25 मिलीलीटर फ़िल्टर्ड मूत्र में 5 मिलीलीटर में जोड़ा गया था। गणना अंशांकन ग्राफ के अनुसार की जाती है, जिसके निर्माण के लिए मानक समाधान से dilutions तैयार किए जाते हैं, जैसा कि तालिका में दर्शाया गया है।

प्राप्त प्रत्येक घोल से, 1.25 मिलीलीटर लिया जाता है और प्रयोगात्मक नमूने के रूप में माना जाता है।

अंशांकन ग्राफ के निर्माण में सीधी रेखा निर्भरता को 1 g/L तक बनाए रखा जाता है। उच्च सांद्रता पर, नमूना पतला होना चाहिए और गणना में कमजोर पड़ने को ध्यान में रखा जाना चाहिए।

मूत्र में कार्बनिक आयोडीन युक्त विपरीत एजेंटों की उपस्थिति में गलत-सकारात्मक परिणाम प्राप्त किए जा सकते हैं। इसलिए, आयोडीन की तैयारी करने वाले व्यक्तियों में परीक्षण का उपयोग नहीं किया जा सकता है; एक गलत-सकारात्मक परिणाम सल्फा दवाओं के उपयोग, पेनिसिलिन की बड़ी खुराक और यूरिक एसिड की उच्च सांद्रता के कारण भी हो सकता है।

ब्यूरेट विधि:

विधि सिद्धांत:

क्षारीय में तांबे के लवण के साथ प्रोटीन के पेप्टाइड बंधन एक बैंगनी परिसर बनाते हैं। प्रोटीन ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड के साथ पहले से अवक्षेपित होते हैं।

आवश्यक अभिकर्मक:

1. 10% ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड घोल।
2. 20% तांबे का घोल (CuSO4∙5H2O)।
3. 3% NaOH समाधान।

अनुसंधान प्रगति:

दैनिक मात्रा से लिए गए मूत्र के 5 मिलीलीटर में, 3 मिलीलीटर ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड घोल, अपकेंद्रित्र को तलछट की एक स्थिर मात्रा में मिलाएं। सतह पर तैरनेवाला एक पिपेट के साथ महाप्राण होता है, फिर अवक्षेप को NaOH समाधान के 5 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है। समाधान में 0.25 मिलीलीटर CuSO4 मिलाया जाता है, मिश्रण को हिलाया जाता है और सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। सतह पर तैरनेवाला क्युवेट में 540 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर आसुत जल के खिलाफ 10 मिमी की ऑप्टिकल पथ लंबाई के साथ फोटोमीटर किया जाता है। प्रोटीन सांद्रता की गणना अंशांकन वक्र से की जाती है, जिसके निर्माण में प्रोटीन सांद्रता (g/l) को कोर्डिनेट अक्ष पर प्लॉट किया जाता है, और विलुप्त होने वाली इकाइयों में ऑप्टिकल घनत्व को एब्सिस्सा अक्ष पर प्लॉट किया जाता है। प्राप्त एकाग्रता के अनुसार, मूत्र में प्रोटीन की दैनिक हानि की गणना की जाती है।

इंडिकेटर पेपर (स्ट्रिप्स) का उपयोग करना:

संकेतक पेपर (स्ट्रिप्स) का उपयोग करके प्रोटीन का पता लगाया जा सकता है, जो अल्बुफन, एम्स (इंग्लैंड), एल्बस्टिक्स, बोहरिंगर (जर्मनी), कॉम्बर्टेस्ट, आदि द्वारा निर्मित होते हैं।

सिद्धांत कुछ एसिड-बेस संकेतकों की तथाकथित प्रोटीन त्रुटि की घटना पर आधारित है। कागज का संकेतक भाग टेट्राब्रोमोफेनॉल ब्लू और साइट्रेट बफर के साथ लगाया जाता है। जब कागज गीला होता है, तो बफर घुल जाता है और संकेतक प्रतिक्रिया के लिए उपयुक्त पीएच प्रदान करता है।

3.0-3.5 पर, प्रोटीन के अमीनो समूह संकेतक के साथ प्रतिक्रिया करते हैं और इसके प्रारंभिक पीले रंग को हरे-नीले रंग में बदलते हैं, जिसके बाद, रंग पैमाने की तुलना में, अध्ययन के तहत मूत्र में प्रोटीन एकाग्रता का मोटे तौर पर अनुमान लगाया जा सकता है। परीक्षण स्ट्रिप्स के सही संचालन के लिए मुख्य शर्त प्रतिक्रिया को आगे बढ़ने के लिए 3.0-3.5 की सीमा में पीएच प्रदान करना है।

यदि कागज निर्देशों में निर्दिष्ट जोखिम से अधिक समय तक परीक्षण मूत्र के संपर्क में है, तो साइट्रेट बफर इसमें घुल जाता है, और फिर संकेतक मूत्र के वास्तविक पीएच पर प्रतिक्रिया करता है, अर्थात। झूठी सकारात्मक प्रतिक्रिया देता है। इस तथ्य के कारण कि बफर की क्षमता सीमित है, भले ही दिशानिर्देशों का पालन किया जाता है, बहुत अधिक क्षारीय मूत्र (पीएच> 6.5), और बहुत अम्लीय मूत्र (पीएच) के नमूनों में गलत सकारात्मक परिणाम प्राप्त होते हैं।
अलग-अलग प्रोटीन की संरचना में प्रतिक्रियाशील अमीनो समूहों की संख्या भिन्न होती है, इसलिए, एल्ब्यूमिन -ग्लोबुलिन (बेंस-जोन्स प्रोटीन, पैराप्रोटीन) की समान मात्रा की तुलना में 2 गुना अधिक तीव्रता से प्रतिक्रिया करते हैं, और ग्लाइकोप्रोटीन की तुलना में बहुत अधिक तीव्रता से प्रतिक्रिया करते हैं। हालांकि, ग्लाइकोप्रोटीन की एक उच्च सामग्री (मूत्र पथ की सूजन के साथ) के साथ बड़ी मात्रा में बलगम के साथ, संकेतक पट्टी पर जमा बलगम के गुच्छे झूठे सकारात्मक परिणाम दे सकते हैं।

संकेतक पेपर के अलग-अलग उत्पादन बैचों के साथ-साथ एक ही कंपनी द्वारा उत्पादित अलग-अलग प्रकार के पेपर की संवेदनशीलता भिन्न हो सकती है, इसलिए, इस विधि द्वारा प्रोटीन की मात्रा का सावधानी से इलाज किया जाना चाहिए। इंडिकेटर पेपर का उपयोग करके मूत्र में प्रोटीन की दैनिक हानि का निर्धारण संभव नहीं है। इस प्रकार, संकेतक कागज रासायनिक नमूनों से नीच है, मुख्य रूप से सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ एक नमूना है, हालांकि यह नमूनों की एक श्रृंखला का जल्दी से अध्ययन करना संभव बनाता है।

मूत्र में बेंस-जोन्स प्रोटीन का पता लगाना:

मल्टीपल मायलोमा, वाल्डेनस्ट्रॉम के मैक्रोग्लोबुलिनमिया के साथ मूत्र में बेंस-जोन्स प्रोटीन उत्सर्जित किया जा सकता है।

अध्ययन केवल सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ एक सकारात्मक परीक्षण के साथ आयोजित करने की सलाह दी जाती है। बेंस-जोन्स प्रोटीन का पता लगाने के लिए संकेतक पेपर अनुपयुक्त है।

सिद्धांत:

थर्मोप्रेजर्वेशन रिएक्शन के आधार पर। 100 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बेंस-जोन्स प्रोटीन के विघटन या बाद में ठंडा होने पर पुन: वर्षा का मूल्यांकन करने वाले तरीके अविश्वसनीय हैं, क्योंकि सभी बेंस-जोन्स प्रोटीन निकायों में उपयुक्त गुण नहीं होते हैं। इस पैराप्रोटीन का सबसे विश्वसनीय पता 40-60 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर वर्षा द्वारा होता है, लेकिन इन परिस्थितियों में भी, बहुत अम्लीय (पीएच 6.5) मूत्र में, मूत्र के कम सापेक्ष घनत्व पर और कम पर वर्षा नहीं हो सकती है। बेंस-जोन्स प्रोटीन की सांद्रता।

आवश्यक अभिकर्मक:

2 एम एसीटेट बफर पीएच 4.9।

अनुसंधान प्रगति:

4 मिलीलीटर की मात्रा में फ़िल्टर किए गए मूत्र को 1 मिलीलीटर बफर के साथ मिलाया जाता है और 15 मिनट के लिए 56 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पानी के स्नान में गरम किया जाता है। बेन्स-जोन्स प्रोटीन की उपस्थिति में, 2 मिनट के भीतर एक स्पष्ट अवक्षेप दिखाई देता है; यदि बेन्स-जोन्स प्रोटीन की सांद्रता 3 g / l से कम है, तो नमूना नकारात्मक हो सकता है। व्यवहार में, यह अत्यंत दुर्लभ है, क्योंकि अधिकांश भाग के लिए मूत्र में बेंस-जोन्स प्रोटीन की एकाग्रता महत्वपूर्ण है।

पूर्ण निश्चितता के साथ, इम्यूनोग्लोबुलिन की भारी और हल्की श्रृंखलाओं के खिलाफ विशिष्ट सीरा का उपयोग करके इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेटिक अध्ययन द्वारा बेंस-जोन्स प्रोटीन का पता लगाया जा सकता है।

एल्बमोसिस (प्रोटिओसिस) की परिभाषा:

एल्बुमोज प्रोटीन टूटने वाले उत्पाद हैं, जिसका सिद्धांत इस तथ्य पर आधारित है कि उबालने पर वे मुड़ते नहीं हैं, लेकिन एक सकारात्मक बायोरेट प्रतिक्रिया देते हैं और अम्लीय वातावरण में कुछ लवणों, विशेष रूप से अमोनियम सल्फेट और जिंक एसीटेट द्वारा नमकीन होते हैं।

सामान्य मूत्र में एल्ब्यूमिन नहीं होता है। वीर्य द्रव के मिश्रण के मामले में सामान्य मूत्र में निशान हो सकते हैं। पैथोलॉजी में, ज्वर की स्थिति, रक्त और प्लाज्मा आधान, एक्सयूडेट्स और ट्रांसयूडेट्स के पुनर्जीवन और ट्यूमर के क्षय के दौरान मूत्र में एल्ब्यूज हो सकते हैं।

आवश्यक अभिकर्मक:

1. संतृप्त सोडियम क्लोराइड घोल।
2. सांद्र सोडियम हाइड्रॉक्साइड विलयन।
3. कॉपर सल्फेट का कमजोर घोल (लगभग रंगहीन)।

अनुसंधान प्रगति:

संतृप्त सोडियम क्लोराइड घोल (मात्रा का 1/3) एसिटिक एसिड के साथ अम्लीकृत मूत्र में मिलाया जाता है, उबाला जाता है और गर्म तरल को फ़िल्टर किया जाता है। एल्ब्यूज निस्यंद में चले जाते हैं, जिसमें उनकी उपस्थिति बाय्यूरेट प्रतिक्रिया से निर्धारित होती है। छानने के लिए 1/2 मात्रा में केंद्रित सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल और कॉपर सल्फेट के कमजोर घोल की कुछ बूंदें मिलाएं। एक सकारात्मक परीक्षण का परिणाम लाल-बैंगनी रंग में होता है।

सल्फोसैलिसिलिक एसिड के साथ सकारात्मक परीक्षण के साथ, मूत्र गर्म होता है। यदि मैलापन गायब हो जाता है और ठंडा होने पर फिर से प्रकट होता है, तो इसका मतलब है कि मूत्र में एल्बुमोज या बेंस-जोन्स प्रोटीन शरीर होता है।

परीक्षण की संवेदनशीलता 0.033 g/l है और इसका उपयोग प्रोटीनमेह के नैदानिक ​​निदान में किया जाता है। प्रोटीन का पता लगाने का सिद्धांत एक विकृतीकरण कारक - केंद्रित नाइट्रिक एसिड या लारियोनोवा के अभिकर्मक के प्रभाव में इसके विकृतीकरण पर आधारित है।

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि एक निश्चित मात्रा में प्रोटीन हमेशा मूत्र में मौजूद होता है, लेकिन, एक नियम के रूप में, एक स्वस्थ व्यक्ति के मूत्र में इसकी एकाग्रता गुणात्मक प्रतिक्रिया की संवेदनशीलता सीमा से नीचे होती है और सरल तरीकों से इसका पता नहीं लगाया जाता है। 0.033 g/l से अधिक प्रोटीन की मात्रा के लिए, नमूना उपयुक्त नहीं है। उच्च सांद्रता में मूत्र को पतला करें या एस्बैक एल्ब्यूमिनोमीटर का उपयोग करें।

मूत्र में कुल प्रोटीन की मात्रा निर्धारित करने के लिए, गेलर परीक्षण पर आधारित एक विधि का उपयोग किया जाता है - ब्रैंडबर्ग-रॉबर्ट्स-स्टोलनिकोव विधि (डब्ल्यू। रॉबर्ट्स, 1830-1899, अंग्रेजी चिकित्सक)। तकनीक में नमूने की संवेदनशीलता की निचली सीमा (0.033 ग्राम / एल) और 2-3 मिनट के रिंग गठन के समय में मूत्र का पतला होना शामिल है।

विश्लेषण प्रगति

अभिकर्मक: केंद्रित (फ्यूमिंग) नाइट्रिक एसिड या लारियोनोवा अभिकर्मक। परीक्षण के लिए मूत्र स्पष्ट और अम्लीय होना चाहिए।

लारियोनोवा अभिकर्मक की तैयारी

सोडियम क्लोराइड का एक संतृप्त घोल तैयार करें (100 मिलीलीटर गर्म पानी में 30-30 ग्राम नमक घोलें, ठंडा होने तक खड़े रहने दें)। सतह पर तैरनेवाला त्याग दिया जाता है और फ़िल्टर किया जाता है। छानने के 99 मिलीलीटर में 1 मिलीलीटर केंद्रित नाइट्रिक एसिड जोड़ें (आप हाइड्रोक्लोरिक एसिड के 2 मिलीलीटर की जगह ले सकते हैं)।

अनुसंधान तकनीक

लगभग समान मात्रा में मूत्र को दीवार के साथ एक परखनली में 1-2 मिली अभिकर्मक के साथ सावधानी से बिछाया जाता है। प्रोटीन की उपस्थिति में, लगभग 2-3 मिनट के बाद, तरल पदार्थों के बीच इंटरफेस में मैलापन देखा जाता है - विकृत प्रोटीन की एक सफेद अंगूठी।

न्यूक्लियोएल्ब्यूमिन या यूरेट लवण की उच्च सांद्रता के कारण नाइट्रिक एसिड का उपयोग करते समय एक गलत सकारात्मक परिणाम हो सकता है। पहले मामले में, ट्यूब के थोड़ा हिलने पर यह गायब हो जाता है, और दूसरे मामले में, रिंग मीडिया के बीच के इंटरफेस की तुलना में बहुत अधिक स्थित होता है और गर्म होने पर गायब हो जाता है; पतला मूत्र के साथ परीक्षण दोहराते समय, अंगूठी नहीं बनती है। कभी-कभी नाइट्रिक एसिड के साथ यूरोक्रोम के ऑक्सीकरण से एक भूरा रंगद्रव्य वलय भी दिखाई देता है।

नाइट्रिक एसिड के विपरीत, लैरियोनिक अभिकर्मक के उपयोग के कई फायदे हैं: रंगद्रव्य के छल्ले लेयरिंग सीमा पर नहीं बनते हैं, और एक सकारात्मक परिणाम स्पष्ट प्रोटीन रिंग देता है।

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साहित्य

K: विकिपीडिया: छवियों के बिना लेख (प्रकार: निर्दिष्ट नहीं)

गेलर टेस्ट की विशेषता वाला एक अंश

गिनती फिर बंटवारे के पीछे चली गई और लेट गई। काउंटेस नताशा के पास गई, उसके सिर को अपने ऊपर वाले हाथ से छुआ, जैसा उसने अपनी बेटी के बीमार होने पर किया था, फिर उसके माथे को अपने होठों से छुआ, जैसे कि यह पता लगाने के लिए कि क्या बुखार है, और उसे चूमा।
- आप ठंडे हैं। तुम सब कांप रहे हो। आपको बिस्तर पर जाना चाहिए, ”उसने कहा।
- लेट जाएं? हाँ, ठीक है, मैं सोने जाऊँगा। मैं अब सोने जा रहा हूँ, - नताशा ने कहा।
चूंकि नताशा को आज सुबह बताया गया कि प्रिंस आंद्रेई गंभीर रूप से घायल हो गए थे और उनके साथ यात्रा कर रहे थे, उसने पहले मिनट में ही बहुत कुछ पूछा कि कहां? जैसा? क्या वह खतरनाक रूप से घायल है? और क्या वह उसे देख सकती है? लेकिन जब उसे बताया गया कि उसे उसे देखने की अनुमति नहीं है, कि वह गंभीर रूप से घायल हो गया था, लेकिन उसका जीवन खतरे में नहीं था, उसने स्पष्ट रूप से उसकी कही गई बातों पर विश्वास नहीं किया, लेकिन आश्वस्त था कि उसने कितना भी कहा, उसने एक ही बात का जवाब होगा, पूछना और बात करना बंद कर दिया। पूरे रास्ते, बड़ी-बड़ी आँखों से, जिसे काउंटेस इतनी अच्छी तरह से जानती थी और जिसके हाव-भाव से काउंटेस इतना डरती थी, नताशा गाड़ी के कोने में निश्चल बैठी थी और अब उसी बेंच पर बैठी थी जिस पर वह बैठी थी। वह कुछ सोच रही थी, कुछ तय कर रही थी या पहले से ही अपने दिमाग में फैसला कर चुकी थी - काउंटेस यह जानती थी, लेकिन वह क्या थी, वह नहीं जानती थी, और इसने उसे डरा दिया और पीड़ा दी।
- नताशा, कपड़े उतारो, मेरे प्यारे, मेरे बिस्तर पर लेट जाओ। (केवल काउंटेस को बिस्तर पर बिस्तर बनाया गया था; मी मी शोस और दोनों युवतियों को घास में फर्श पर सोना पड़ा।)
"नहीं, माँ, मैं यहाँ फर्श पर लेट जाऊँगा," नताशा ने गुस्से में कहा, खिड़की के पास गई और उसे खोल दिया। एडजुटेंट की कराह खुली खिड़की से अधिक स्पष्ट रूप से सुनाई दे रही थी। उसने अपना सिर नम रात की हवा में फँसा लिया, और काउंटेस ने देखा कि उसके पतले कंधे सिसकते हुए कांप रहे हैं और फ्रेम से टकरा रहे हैं। नताशा जानती थी कि यह राजकुमार आंद्रेई नहीं था जो कराह रहा था। वह जानती थी कि प्रिंस आंद्रेई उसी संबंध में झूठ बोल रहे थे जहां वे थे, मार्ग के पार एक और झोपड़ी में; लेकिन इस भयानक अनवरत कराह ने उसे सिसक दिया। काउंटेस ने सोन्या के साथ नज़रों का आदान-प्रदान किया।
"लेट जाओ, मेरे प्रिय, लेट जाओ, मेरे दोस्त," काउंटेस ने नताशा के कंधे को हल्के से अपने हाथ से छूते हुए कहा। - अच्छा, सो जाओ।
"आह, हाँ ... मैं अब लेट जाऊँगा," नताशा ने कहा, जल्दबाजी में कपड़े उतारे और अपनी स्कर्ट के तार फाड़ दिए। उसने अपनी पोशाक को फेंक दिया और एक जैकेट पहन ली, उसने अपने पैरों को ऊपर उठा लिया, फर्श पर तैयार बिस्तर पर बैठ गई और अपने कंधे पर अपनी छोटी, पतली चोटी फेंक कर, बुनाई शुरू कर दी। पतली लंबी आदतन उंगलियां जल्दी से, चतुराई से अलग हो गईं, बुनी गईं, एक चोटी बांध दी। नताशा का सिर, आदतन हावभाव के साथ, पहले एक तरफ मुड़ा, फिर दूसरी तरफ, लेकिन उसकी आँखें, बुखार से खुली, निश्चित रूप से सीधे आगे की ओर देख रही थीं। जब रात की पोशाक खत्म हो गई, तो नताशा चुपचाप दरवाजे के किनारे से घास पर फैली चादर पर बैठ गई।
"नताशा, बीच में लेट जाओ," सोन्या ने कहा।
"नहीं, मैं यहाँ हूँ," नताशा ने कहा। "बिस्तर पर जाओ," उसने झुंझलाहट के साथ जोड़ा। और उसने अपना चेहरा तकिये में दबा लिया।

हेलर रिंग टेस्ट मूत्र के प्रोटीन घटक का विश्लेषण करने में मदद करता है। जोसेफ गेलर द्वारा विकसित यह विधि आसंजन की भौतिक-रासायनिक प्रक्रिया पर आधारित है। मूत्र के लिए एक निश्चित स्थिति की आवश्यकता होती है: जांच करते समय एक स्पष्ट नमूने की जरूरत हैजो अम्लीय है।

अध्ययन के लिए नाइट्रिक एसिड HNO3 के सांद्रण का उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, लारियोनोवा का अभिकर्मक इस विधि के लिए उपयुक्त है। इसे बनाने के लिए, एक केंद्रित अवस्था में सोडियम क्लोराइड का घोल तैयार किया जाता है: एक सौ मिलीलीटर पानी में पच्चीस मिलीग्राम नमक मिलाया जाता है।

अगला, तरल गरम किया जाता है, जब ऐसा होता है नमक का पूर्ण विघटन. समाधान के ठंडा होने के बाद, सतह पर तैरनेवाला हटा दिया जाता है और निन्यानबे मिलीलीटर HNO3 सांद्रता के एक मिलीलीटर के साथ मिलाया जाता है। इसे दो मिलीलीटर हाइड्रोक्लोरिक एसिड सांद्रता से भी बदला जा सकता है।

एल्गोरिथम का संचालन

गेलर परीक्षण के लिए, आपको एक परखनली की आवश्यकता होगी जिसमें अभिकर्मक को एक से दो मिलीलीटर की मात्रा में रखा जाता है। इसके बाद, अभिकर्मक के साथ समान अनुपात में पोत की दीवार के साथ परीक्षण मूत्र को बहुत सावधानी से जोड़ा जाता है। के बीत जाने के बाद तीन मिनटबातचीत में, प्रोटीन की उपस्थिति मूत्र और अभिकर्मक के बीच एक बादल की सीमा रेखा के रूप में दिखाई देगी। यह वलय प्रोटीन डेन्चर्ड एल्कोहल है।

अध्ययन का एक गलत सकारात्मक प्रभाव नाइट्रिक एसिड के उपयोग के साथ-साथ बड़ी मात्रा में न्यूक्लियोएल्ब्यूमिन या यूरेट लवण के साथ हो सकता है। पहली स्थिति में, ट्यूब को थोड़ा हिलाने पर रिंग घुल जाती है। दूसरी स्थिति एक अंगूठी की उपस्थिति मानती है, जिसे विभाजन रेखा से थोड़ा ऊपर स्थानीयकृत किया जाएगा। तरल का तापमान बढ़ने पर यह घुल जाता है। कुछ मामलों में, एक भूरे रंग की अंगूठी दिखाई देती है, यह नाइट्रोजन घटक द्वारा यूरोक्रोम के ऑक्सीकरण का परिणाम है।

HNO3 और लारियोनोवा के अभिकर्मक के उपयोग के प्रभाव की तुलना करते हुए, मैं दूसरे विकल्प को अधिक सटीक रूप से नोट करना चाहूंगा। इसके कई फायदे हैं:

• लारियोनोवा का अभिकर्मक विश्लेषण में वर्णक वलय नहीं देता है।
• प्रोटीन के छल्ले हेलर पद्धति का उपयोग करने की तुलना में अधिक स्पष्ट रूप से दिखाए जाते हैं।
• नाइट्रिक एसिड संरक्षित है।
• अभिकर्मक इतना खतरनाक नहीं है और कपड़े पर होने के कारण इसके माध्यम से नहीं जलता है।

नमूने का उपयोग करते समय विपक्ष

1. गेलर परीक्षण का उपयोग करना एक जटिल प्रक्रिया है जिसके लिए काफी समय की आवश्यकता होती है, साथ ही एक नाइट्रिक एसिड सांद्रण भी।
2. एक भूरे रंग का रंगद्रव्य वलय हो सकता है, जो प्रोटीन का पता लगाने से रोकता है।
3. यूरिक एसिड नमक युक्त सामग्री में, एक सफेद अंगूठी बन सकती है, जो तरल पदार्थ को अलग करने वाली रेखा के ऊपर स्थित होती है।
4. साथ ही, यूरिक एसिड की बड़ी मात्रा के मामले में अध्ययन गलत सकारात्मक परिणाम दे सकता है।

विकल्प

मूत्र में प्रोटीन का निर्धारण करने का एक तेज़ और आसान तरीका एक विशेष पेपर है, जो एक संकेतक है।

अध्ययन के इस संस्करण में, एक कागज़ की पट्टी को सामग्री में डुबोया जाता है, जिसमें एक विशेष संसेचन होता है, जिसके कारण संकेतक कागज, मूत्र के संपर्क में आने पर, पीले से नीले रंग की सीमा में रंग प्राप्त कर लेता है। ह्यू प्रोटीन एकाग्रता को इंगित करता है। एक पैमाना है जिसके द्वारा यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है।

परिणाम यथासंभव सटीक होने के लिए, आपको कुछ नियमों का पालन करना चाहिए:

• सामग्री का पीएच पर होना चाहिए 3.0 से 3.5. क्षार की एक बड़ी मात्रा झूठी सकारात्मक देगी, और मूत्र में बड़ी मात्रा में एसिड के मामले में, झूठी नकारात्मक।
• पेपर इंडिकेटर आवंटित समय से अधिक समय तक सामग्री के संपर्क में नहीं रहना चाहिए। अन्यथा, परिणाम पक्षपाती होगा।
• इसके अलावा, यदि बहुत अधिक बलगम है, तो एक गलत सकारात्मक परिणाम हो सकता है।
• कागज और उसके निर्माता के आधार पर, संकेतक की संवेदनशीलता भिन्न हो सकती है। इसलिए आपको पेशाब में प्रोटीन की मात्रा के लिए पूरी तरह से इस टेस्ट पर निर्भर नहीं रहना चाहिए।
• दैनिक मूत्र प्रोटीन की मात्रा नहीं दिखा सकता है।